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            CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)

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            • CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)

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            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-04-19 16:00:34瀏覽次數(shù):271

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次|2500次|10000次
            貨號(hào) FS-X9530 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
            CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)公司*的商品:生物素標(biāo)記的兔抗猴IgM氨苯砜(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            性磷酶(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgM氨芐西林/氨芐青霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
            膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM氨芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗猴IgM氨丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            FITC標(biāo)記的兔抗猴IgM氨芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Huma

            詳細(xì)介紹

            產(chǎn)品屬于:

            中文名稱

            英文名稱

            產(chǎn)品規(guī)格

            發(fā)貨周期

            CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)

            Cell Counting Kit-8

            100次|500次|2500次|10000次

            1~3天

            商品介紹:

            本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞 毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。

            WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成 橙黃色的formazan(參考下圖)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān) 系。


            WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT 被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來(lái)溶解;而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可 以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn) 定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。

            WST-8和WST-1相比,檢測(cè)靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。

            本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè),也可以用于抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒 性檢測(cè),或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)。

            本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作 。無(wú)須使用同位素,所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜?大批量樣品的檢測(cè)。酚紅和血清對(duì)本試劑盒的測(cè)定無(wú)明顯影響。

            WST-8對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測(cè)時(shí)間更加靈 活,便于找到最佳測(cè)定時(shí)間。
            培養(yǎng)操作步驟:

            1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

            2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

            3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

            4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

            5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

            一氧化碳血紅蛋白(HbCO)elisa試劑盒英文名稱:HbCO ELISA Kit血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體包裝5g

            一氧化氮合成酶(NOS)elisa試劑盒英文名稱:NOS ELISA Kit膜粘連蛋白2受體抗體包裝1g

            一氧化氮(NO)elisa試劑盒英文名稱:NO ELISA Kit血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體包裝250mg

            葉酸受體(FOLR)elisa試劑盒英文名稱:FOLR ELISA Kit拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝100g

            葉酸(FA)elisa試劑盒英文名稱:FA ELISA Kitα-1抗胰糜蛋白酶抗體包裝25g

            鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白(KLH)elisa試劑盒英文名稱:KLH ELISA Kitα-1抗胰蛋白酶抗體包裝1g

            氧化型谷胱甘肽(GSSG)elisa試劑盒英文名稱:GSSG ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族6抗體包裝5g

            氧化型谷胱甘肽(GSGS)elisa試劑盒英文名稱:GSGS ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體包裝1g

            氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)elisa試劑盒英文名稱:OxLDL ELISA Kit脂聯(lián)素受體2抗體包裝5g

            氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)elisa試劑盒英文名稱:Ox-HDL ELISA KitANGEL1蛋白抗體包裝100g

            氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒英文名稱:OLAb ELISA KitANGEL2蛋白抗體包裝25g

            氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa試劑盒英文名稱:OxLDL ELISA KitANKLE2蛋白抗體包裝500g

            煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)elisa試劑盒英文名稱:NADPH ELISA Kit特異性錨樣蛋白1抗體包裝25g

            煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)elisa試劑盒英文名稱:NADH ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體包裝5g

            牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)elisa試劑盒英文名稱:DMP1 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體包裝25g

            芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體白介素2(IL2)Palomid 529 是一種有效的 mTORC1 和 mTORC2 復(fù)合體抑制劑。
            CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)棕櫚酸

            其他 軟脂酸;十六酸;鯨蠟酸;正十六烷酸;鯨乙酸;十六烷酸

            英文名稱: Palmitic acid

            其他英文名稱: Hexadecylic acid ;Cetylic acid;Carboxylic acid C16

            產(chǎn)品規(guī)格: AR

            包裝:500克

            產(chǎn)品規(guī)格: 標(biāo)準(zhǔn)品,99%

            包裝:250毫克/5克

            CAS號(hào):57-10-3

            C16H32O2=256.43

            級(jí)別:AR

            碘值:≤1.0 I2g/100g

            熔點(diǎn):62.5~64.0℃

            酸值:218.0~220.0KOHmg/g

            鐵:≤0.0002%

            無(wú)機(jī)酸:合格

            中性油及不皂化物:合格

            灼燒殘?jiān)?/span>≤0.05%

            級(jí)別:Standard for GC

            含量:≥99.0(GC)

            vapor pressure:10 mmHg ( 210℃)

            沸點(diǎn):271.5℃/100 mmHg

            熔點(diǎn):61.0~62.5℃

            密度:0.852 g/ml at 25℃

            性狀:鱗狀或針狀結(jié)晶。易溶于熱乙醇、丙醇、丙酮、苯和,不溶于水。相對(duì)密度(d624)0.853。熔點(diǎn)63~64℃。沸點(diǎn)351.5℃。折光率(n80D)1.4273。閃點(diǎn)206℃。半數(shù)致死量(小鼠,靜脈)57mg/kg。有刺激性

            用途:生化研究。測(cè)定水的硬度和鈣、鎂、鋇、鉛、汞、鋅。有機(jī)合成,各種棕櫚酸金屬鹽和防水劑。

            保存:RT

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

            2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

            5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

             


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