詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
GW 441756 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
GW441756是特異的高活性原肌球蛋白相關(guān)激酶A(TrkA)抑制劑,IC50為2nM,對(duì)c-Raf1和CDK2幾乎無活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):504433-23-2 純度:99.00% 分子量:275.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
寡養(yǎng)單胞菌屬人輪狀病IgMAnti-TLK2 Antibody人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒
淺玫瑰小單孢菌大鼠遲現(xiàn)抗原Anti-TLR1 Antibody 人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌大鼠降鈣Anti-TMBIM1 Antibody人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒
Bacillus pervagus人艾柯病IgMAnti-TLR13 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
環(huán)帶青霉人抗呼吸道合胞病抗體Anti-TMBIM1 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
棉尾孢大鼠骨鈣/骨谷蛋白Anti-TMBIM1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒
金直絲鏈霉菌大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-TMBIM4 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒
釀酒酵母人麻疹病IgMAnti-TMC8 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
肺形側(cè)耳人柯薩奇病IgMAnti-TMEM101 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
泡盛曲霉大鼠促甲狀腺Anti-TMEM145 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌大鼠皮質(zhì)Anti-TMEM101 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)ELISA試劑盒
糞纖維單胞菌人柯薩奇病IgGAnti-TMEM173 Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌大鼠雌二Anti-TMEM185A Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
短乳桿菌人結(jié)核菌桿抗體IgGAnti-TMEM30B Antibody人泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
紅球菌人瘢痕性天皰瘡抗體Anti-TMEM237 Antibody人泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
生癌腸桿菌大鼠脫氫表雄硫酯Anti-TMEM30CP Antibody人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒
神經(jīng)突起生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子受體UNC5D抗體蘇云金芽孢桿菌黑克亞種抗孕7
神經(jīng)突起生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子受體Unc5a抗體蘇云金芽孢桿菌幕蟲亞種抗睪小鼠7
UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體蘇云金芽孢桿菌以色列亞種抗型肝炎病毒NS5抗原單克抗體7株
泛硫酯L3抗體蘇云金芽孢桿菌日本亞種抗戍型肝炎病毒單克抗體7株
TrkA抑制劑(GW 441756)崩潰
英文名稱:Driselase from Basidiomycetes sp
產(chǎn)品規(guī)格:BR,10%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):85186-71-6
級(jí)別:BR
Protein:≥10% biuret
纖維活力Cellulase activity:≥100u/g solid
活力定義Unit definition:One unit will liberate 1.0 micromole of glucose from cellulose in one hour at pH 5.0 at 37℃
昆布糖活力laminarinase activity:≥10u/g solid
活力定義:One unit will liberate 1.0 mg reducing sugar (as glucose)from Laminarin per minute at pH 5.0 at 37℃
木聚糖活力Xylanase activity:≥3u/g solid
來源:牛血
活力:2500~7000 units/mg protein
活力定義:One unit will inhibit reduction of cytochrome c by 50% in a coupled system with xanthine oxidase at pH 7.8 at 25℃ in a 3.0 mL reaction volume. Xanthine oxidase concentration should produce an initial ΔA550 of 0.025 ± 0.005 per min
來源:豬血
活力:2500~7000u/mg protein
性狀:粉紅色粉末或固體。催化O2-+O2-+2H+=H2O2+O2反應(yīng)含有兩個(gè)相同的亞單位。按其金屬輔離子不同分為三種類型:Cu-Zn-SOD,每一個(gè)亞單位含銅和鋅離子各一個(gè)分子量34000±(4%);Mn-SOD,分子量400000;Fe-SOD,分子量約40000
性狀:淡藍(lán)色粉末,由紅細(xì)胞、肝和其他哺乳動(dòng)物組織分離而得的金屬蛋白。催化O2-+O2-+2H+=H2O2+O2反應(yīng)含有兩個(gè)相同的亞單位。按其金屬輔離子不同分為三種類型:Cu-Zn-SOD,每一個(gè)亞單位含銅和鋅離子各一個(gè)分子量34000±(4%);Mn-SOD,分子量400000;Fe-SOD,分子量約40000
用途:生化研究。是催化O2-+O2-+2H+H2O2+O2反應(yīng)的,它普遍存在于需氧化物中,保護(hù)機(jī)體對(duì)抗氧自由基的作用,是一種重要的氧自由基劑。
保存:-20℃