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詳細介紹
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠輸尿管成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1848 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠小腦顆粒細胞 | BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞 |
血管內皮生長因子單克隆抗體 | Cy5.5標記的EDC3蛋白抗體 |
U251 MG/TMZ+LUC(3000)人類星形膠質瘤耐細胞熒光標記 | Cy5.5標記的CULLIN抗體 |
U266人骨髓瘤細胞 | Cy5.5標記的細胞信號轉導分子Smad-1抗體 |
U87MG人腦星形膠質母細胞瘤 | Cy5.5標記的線粒體核糖體蛋白S17抗體 |
U87MG+RFP人腦星形膠質母細胞瘤+RFP | Cy5.5標記的磷化細胞信號轉導分子Smad-1抗體 |
U-937 人淋巴瘤細胞 | Cy5.5標記的嗅覺受體52B2抗體 |
UM-UC-3人膀胱移行細胞癌 | Cy5.5標記的T淋巴細胞負調節(jié)蛋白抗體 |
VCAP人前列腺癌細胞 | Cy5.5標記的雙甲基精氨水解1抗體 |
WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質瘤細胞 | Cy5.5標記的信號通路Wnt3a抗體 |
WM-115人黑瘤細胞 | Cy5.5標記的MFSD8蛋白抗體 |
WPMY-1人正常前列腺基質永生化細胞 | 小鼠輸尿管成纖維細胞Cy5.5標記的鈣調蛋白OCM2抗體 |
WRL68人正常肝細胞 | Cy5.5標記的肌醇六磷激1抗體 |
XWLC-05云南宣威人肺腺癌細胞系 | Cy5.5標記的磷化T細胞活化連接蛋白抗體 |
BAF3小鼠原B細胞株 | Cy5.5標記的富含亮氨重復蛋白26抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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