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            上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>>淋巴細(xì)胞分離液1.084

            淋巴細(xì)胞分離液1.084

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-04-20 14:31:12瀏覽次數(shù):321

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
            貨號 FS-X9748 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
            淋巴細(xì)胞分離液1.084公司*的商品:硝唑偶聯(lián)血藍(lán)蛋白穿山龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            三聚與雞卵白蛋白偶聯(lián)物穿心蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
            神經(jīng)元特異性烯化抗原穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            Nogo-66 (1-40)船形烏頭(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            神經(jīng)肽 Y(1-36)垂盆草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            神經(jīng)保護(hù)肽椿皮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

            詳細(xì)介紹

            產(chǎn)品屬于:

            中文名稱

            英文名稱

            產(chǎn)品規(guī)格

            發(fā)貨周期

            淋巴細(xì)胞分離液1.084

            Lymphocyte separation medium1.084

            100ml

            1~3天

            商品介紹:

            淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium 1.084,簡稱LSM-1.084)是一種無菌的即用型分離液,基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良,使得操作簡單快速且分離效率更高。本品是無菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸鈉混合溶液,密度為1.084 g/ml,內(nèi)毒素含量很低(<0.12 EU/ml),是在嚴(yán)格控制的環(huán)境下加工的,條件符合ISO13485:2003標(biāo)準(zhǔn)和GMP認(rèn)證。相對于密度為1.077 g/ml的人淋巴細(xì)胞分離液,本品適用于分離更高密度的人單個核細(xì)胞,包括外周血,臍帶血以及骨髓瘤來源的組織樣本。還適用于分離大小鼠血細(xì)胞,正因為嚙齒動物的淋巴細(xì)胞密度稍高于人淋巴細(xì)胞。

            工作原理

            去纖維蛋白或抗凝人血以1:1的比例用無菌生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,小心的添加在分離液上層(不要混雜在一起),之后離心30-40min。離心過程中,差速遷移使其終形成幾個不同的細(xì)胞分層:

            ①聚集在管底的顆粒主要是Ficoll 聚集的紅細(xì)胞以及沉淀物;

            ②緊挨著上面一層的顆粒主要是粒細(xì)胞,其處于LSM-1.084溶液的滲透壓臨界,具有足夠高的密度遷移穿過LSM-1.084溶液層。

            ③單個核細(xì)胞分布在血漿和LSM-1.084分離液的中間層,還包括一些沉降系數(shù)低(密度低)的顆粒,如血小板。

            淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞和血小板不具有足夠高的密度穿透LSM-1.084分離液層,因此這些細(xì)胞在血漿和LSM-1.084分離液層聚集形成一個中間分層。吸取中間層,用平衡鹽溶液短暫洗滌,以除去血小板,細(xì)胞分離介質(zhì)和血漿,就可以單個核細(xì)胞。通常情況下,分離所得的細(xì)胞中95±5%為單個核細(xì)胞,細(xì)胞存活率>90%,回收率為60±20%。

            儲存條件:4~8℃,避光
            培養(yǎng)操作步驟:

            1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

            2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

            3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

            4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

            5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

            磷咯萘啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TopiramateCAP1抗體包裝5g

            磷喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tozasertib,VX-680/MK-0457粒-巨噬集落激因子3抗體包裝1g

            磷哌喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trospium chloride 表面趨化因子受體7抗體包裝250mg

            磷氫鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AG-014699色c氧化10抗體包裝5g

            膦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carfilzomib/PR171CRTAM抗體包裝5g

            硫噴妥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CEP-18770單核趨化蛋白4抗體包裝100ml

            硫普羅寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Managlinat Dialanetil/CS-917NK抑制性受體2DL3抗體包裝25ml

            硫阿米卡星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nolatrexed dihydrochlorideCRX抗體包裝100g

            硫阿托品(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PD 173074CD8抗體包裝25g

            硫安普霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PH-797804磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝500g

            硫巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tifluadom/KC-5103磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝5g

            硫長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝25g

            硫長春新堿/硫基長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝5g

            硫多粘菌B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vecuronium Bromide分裂周期蛋白25抗體包裝25g

            硫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vecuronium Bromide磷化分裂周期蛋白25抗體包裝5g

            腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格:>98%纖連蛋白試劑盒苔黑酚葡萄糖苷;Orcinolgluco

            米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖調(diào)蛋白試劑盒太子參環(huán)肽B;Heterophyllin

            球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR細(xì)小病B19試劑盒土木香內(nèi)酯;Alantolactone
            淋巴細(xì)胞分離液1.084胭脂紅

            其他蟲紅;洋紅;卡紅;胭脂蟲紅;7-β-D-吡喃葡萄糖基-3,5,6,8-四羥基-1-甲基-9,10-二氧代-蒽-2-羧;胭脂蟲粉;洋紅色淀;洋紅色淀

            英文名稱:Carmine

            其他英文名稱:Alum lake of carminic acid;Cochineal;Nacarat;Natural Red 4 ;7-beta-D-Glucopyranosyl-3,5,6,8-tetrahydroxy-1-methyl-9,10-dioxo-anthracene-2-carboxylic acid

            產(chǎn)品規(guī)格:FMP

            包裝:10克

            CAS號:1390-65-4

            C88H72O52AI2Ca3•4H2O=2206

            級別:For microscopy

            光譜鑒定:合格

            性狀:鮮紅色粉末或片狀物,易磨成粉。系胭脂紅的鋁鈣色淀,溶于硼砂液,還溶于堿金屬的氫氧化物或碳鹽類成深紅色溶液,部分溶于熱水,幾乎不溶于冷水或稀

            用途:生化研究。制備胭脂紅;胚胎學(xué)中作整體染色;細(xì)胞核染色;滴定溶液指示劑;顯微分析;熒光分析;染料、食物的著色等

            保存:RT,避光

            實驗報告:

            一、分離與培養(yǎng):

            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

            二、免疫熒光鑒定:

            1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

            2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

            3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

            4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

            5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

            6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

             


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