操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:SPHK1抑制劑(PF-543 Citrate)
英文名稱:PF-543 Citrate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 PF-543Citrate是新穎的可滲透細(xì)胞的SPHK1抑制劑,Ki值為4.3nM。對(duì)SPHK1的選擇性是SPHK2的100倍以上。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1415562-83-2 純度:98.22% 分子量:657.73 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
櫟小皮傘大鼠肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌兔子補(bǔ)體片斷3aAnti-NECTIN1 Antibody人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌小鼠溶菌Anti-NEDD1 Antibody人鈣調(diào)磷(CaN)ELISA試劑盒
鍋孢霉人CD14分子Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調(diào)磷(CaN)ELISA試劑盒
栗酒裂殖酵母人凋亡誘導(dǎo)因子Anti-NECTIN3 Antibody人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒
耐輻射奇球菌兔子基質(zhì)金屬蛋白3Anti-NEFH Antibody人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒
白僵菌大鼠磷化乙酰羧化Anti-NEFH Antibody人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒
釀酒酵母小鼠可溶性CD30Anti-NEFL Antibody人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒
臭曲霉兔磷TRAP-5b ELISA試劑盒Anti-NEDD4 Antibody 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒
冠突曲霉人白共同抗原Anti-NEFL Antibody人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒
冷桿菌兔子可溶性CD40配體Anti-NEFM Antibody人脂肪結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
聚生殼菌小鼠可溶性肌球蛋白重鏈Anti-NEIL3 Antibody人脂肪結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
海洋桿菌大鼠金屬硫蛋白Anti-NEGR1 Antibody人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
膜醭畢赤酵母大鼠心肌特異性肌鈣蛋白TAnti-NEIL3 Antibody人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
化妝品 氯霉、甲硝唑小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1Anti-NEFM Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
釀酒酵母兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類Anti-NEK2 Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒
胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體邊莢魚藤根瘤菌人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞
環(huán)指蛋白149抗體假地豆根瘤菌人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體波葉山螞蟥根瘤菌人胎盤絨毛癌細(xì)胞
環(huán)指蛋白180抗體本氏木蘭根瘤菌人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞
SPHK1抑制劑(PF-543 Citrate)膽紅
其他 膽深紅;膽紅質(zhì);膽深
英文名稱: Bilirubin(ex pig)
其他英文名稱: 2,17-Diethenyl-1,10,19,22,23,24-hexahydro-3,7,13,18-tetramethyl-1,19-dioxo-21H-biline-8,12-dipropanoic acid
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):635-65-4
C33H36N4O6=584.67
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
水分:≤1.0%
性狀:淺橙色到深紅棕色單斜棱晶。豬膽來源。對(duì)光敏感。加熱色漸漸變黑而不熔融。溶于、、氯、二硫化碳、和堿,微溶于乙,幾乎不溶于水。淺綠色溶液在紫外線下顯紅色熒光。干燥時(shí)穩(wěn)定,溶液在暗處穩(wěn)定,堿溶液易氧化。
用途:生化研究。分析化學(xué)。生化研究。合成牛黃??寡鮿?,保護(hù)膜磷脂免受過氧化氫自由基的氧化。即使在納摩爾濃度也能保護(hù)神經(jīng)元免受氧化損害
保存:2~8℃,避光