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詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Senescence β-Galactosidase Staining Kit | >100次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是一種基于衰老時SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調(diào)而對衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測的試劑盒。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測到細(xì)胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測，也可以用于組織切片的衰老檢測。 |
試劑盒組份：
β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml
絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力，在不能分裂后就進(jìn)入衰老(senescence)狀態(tài)。此時細(xì)胞仍然是存活的，但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老(senescence)的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂，并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊，不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠，也不同于細(xì)胞生長接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大，表達(dá)pH 6.0時有高酶活性的β-半乳糖苷酶。細(xì)胞衰老也被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式，同時也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。
本細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒，以X-Gal為底物，在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
頭孢匹林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： GeniposideDYX1C1蛋白抗體包裝5g
頭孢羥芐 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GeniposideE3泛蛋白連接dzip3抗體包裝1g
頭孢曲松鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 17-Methyltestosterone三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體包裝250mg
頭孢噻吩（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetrahydro-L-Biopterin free base多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體包裝5g
頭孢噻呋鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tirofiban HCl三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體包裝100mg
頭孢噻肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tirofiban HCl磷化三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體包裝1g
頭孢妥侖匹酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pullulan迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白抗體包裝500mg
頭孢西丁鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vitamin E,dl-α-tocopherol雙氧化激活因子2抗體包裝5g
頭孢西丁（頭孢西?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： StavudineRNA結(jié)合泛連接DZIP3抗體包裝100mg
頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Stavudine二氫二脫氫1/2抗體包裝500mg
頭孢唑啉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moclobemide形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體包裝1g
頭孢唑肟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Moclobemide質(zhì)分裂付出蛋白2抗體包裝5g
頭孢唑肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Astragaloside IV質(zhì)分裂付出蛋白4抗體包裝1g
土拉霉A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Astragaloside IV質(zhì)分裂付出蛋白5抗體包裝250mg
褪黑,松果體（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nateglinide淋巴抗原75抗體包裝50ml
: D8(1957)資源名稱: 傷門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR維生D2試劑盒四氫小檗堿;Tetrahydroberb
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品維生C試劑盒蘇木;Hematoxylin
膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,可用于培養(yǎng)維生B6試劑盒雙醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒溴化銅
其他 二溴化銅；二溴化銅(II)
英文名稱： Cupric bromide
其他英文名稱： Copper(II) bromide； Copper bromide
產(chǎn)品規(guī)格： AR，98.5%
包裝：250克
CAS號：7789-45-9
CuBr2=223.35
級別：AR
含量：98.5～100.5%
氯化物：≤0.2%
硫鹽：≤0.015%
水不溶物：≤0.01%
鐵：≤0.01%
堿金屬及堿士金屬：≤0.2%
性狀：黑色似碘片的單斜結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。易吸濕。易溶于水，溶于乙、和水，幾乎不溶于和濃硫。相對密度(d204 )4.71。熔點498℃。沸點900℃。
用途：生化研究。分析試劑。有機(jī)合成溴化劑。乙?；奂兹┓€(wěn)定劑。濕度指示劑。
保存：RT，避光
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