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詳細介紹
人甲狀腺微血管內(nèi)皮細胞
培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系
傳代特性：細胞特性確定傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相： 空氣，95%；CO2 ，5%
細胞簡介：甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體， 屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動物它位于頸部甲 狀軟骨下方，氣管兩旁。人類的甲狀腺形似蝴蝶。甲狀腺控制使用能量的速度、 制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)身體對其他荷爾蒙的敏感性。
甲狀腺的血液供應(yīng)非常豐富。全身血液大約每小時可在甲狀腺通過一次。甲狀腺 由甲狀腺上動脈和甲狀腺下動脈供給血液和營養(yǎng)。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 人甲狀腺微血管內(nèi)皮細胞 | 商品貨號 | A01X1354 |
組織來源 | 甲狀腺組織 | 種屬來源 | 人 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁培養(yǎng) |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 多角形細胞 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雞骨骼肌細胞 | 人心臟纖維原細胞 |
核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1 （核內(nèi)參）重組兔單克隆抗體 | 脂質(zhì)運載蛋白單克隆抗體 |
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小鼠微血管周細胞 | Smad4重組兔單克隆抗體 |
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大鼠胰島β細胞 | 鐵蛋白輕鏈抗體 |
小鼠心臟纖維原細胞 | 肌紅蛋白抗體 |
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小鼠胸腺淋巴細胞 | 人甲狀腺微血管內(nèi)皮細胞植物延展-β |
大鼠支氣管平滑肌細胞 | 降鈣原單克隆抗體 |
小鼠牙齦上皮細胞 | 麥芽糖結(jié)合蛋白單克隆抗體 |
大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞 | 血管緊張轉(zhuǎn)換2抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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