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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1552 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 腎組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
詳細介紹
大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
包被條件：PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
傳代比例：1:2
細胞簡介：大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞 | 商品貨號 | A01X1552 |
組織來源 | 腎組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人腎實質(zhì)細胞 | Ocut-2C人甲狀腺癌細胞（未分化） |
間皮重組兔單克隆抗體 | 橋粒糖蛋白4抗體 |
NCI-H929人骨髓瘤細胞 | 脂肪?；oA還原1抗體 |
NCI-H82人小細胞肺癌細胞 | MAWD結(jié)合蛋白抗體 |
NCI-N87人胃癌細胞 | 水蛭抗體 |
NCI-N87+LUC人胃癌細胞熒光標記 | 上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體 |
NCM 460人正常結(jié)腸上皮細胞 | 環(huán)指蛋白23抗體 |
NK-92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞 | 中心體蛋白110抗體 |
NK-92 MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞 | 腫瘤/睪丸抗原135抗體 |
NOZ人膽囊癌細胞 | 角化蛋白S100A18抗體 |
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Nthy-ori 3-1人甲狀腺正常細胞 | 大鼠腎動脈內(nèi)皮細胞磷二酯4A8抗體 |
OCI-AML3人急性髓細胞性白血病細胞 | 泛融合降解樣蛋白1抗體 |
OCI-LY3人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 | 分泌性磷蛋白24抗體 |
pc-9人肺癌細胞 | 神經(jīng)肽S受體1/G蛋白偶聯(lián)受體154抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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