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            細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)

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            更新時(shí)間:2022-04-20 11:44:14瀏覽次數(shù):673

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
            貨號(hào) FS-X9662 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
            細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)正在出售的產(chǎn)品:兔IgG親和層析柱延胡索(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            小鼠IgG親和層析柱延胡索乙;消旋延胡索乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
            重組蛋白A親和層析柱延齡草苷;地索苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            GST融合蛋白親和層析柱芫花(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
            His鎳柱(His蛋白純化介質(zhì)填料)芫花條(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
            重組蛋白G親和層析柱巖

            詳細(xì)介紹

            中文名稱:細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)

            英文名稱:

            產(chǎn)品規(guī)格:20T

            發(fā)貨周期:1~3天

            保存條件:-20℃冰凍保存。

            保存期:一年

            工作原理:

            在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位,可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合熒光素 FITC或者過氧化物酶 POD 標(biāo)記的鏈酶親和素(SABC-FITC/SABC-POD)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 發(fā)射熒光,在熒光顯微鏡下呈明亮黃綠色。POD的在加入顯色底物 DAB 顯色后,凋亡的細(xì)胞核呈棕黃色。用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,在不同切片上用兩套不同顯示系統(tǒng)觀察。


            試劑盒內(nèi)容:

            1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

            2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl

            3.DIG-dUTP(×20)20μl

            4.封閉液(Blocking Reagent)4ml

            5.生物素化抗抗體(× 100)20μl

            6.SABC-FITC(× 100)20μl

            7.SABC-POD(× 100)20μl

            8.Proteinase K(×200)50μl

            9.抗體稀釋液 4ml

            10.未染色陽(yáng)性對(duì)照片 2 張。

            注意事項(xiàng):

            1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

            2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

            3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

            4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

            5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

            6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

            7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

            8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

            9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

            10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

            11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

            補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)elisa試劑盒英文名稱:C1INH ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框86抗體包裝5g

            補(bǔ)體1q(C1q)elisa試劑盒英文名稱:C1q ELISA Kit鈣粘附分子18抗體包裝25g

            酮脫氫磷(PDP)elisa試劑盒英文名稱:PDP ELISA KitCD276抗體包裝5g

            酮脫氫激同工4(PDK4)elisa試劑盒英文名稱:PDK4 ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框25抗體包裝1g

            酮脫氫β(PDHβ)elisa試劑盒英文名稱:PDHβ ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框36抗體包裝5g

            酮脫氫α(PDHα)elisa試劑盒英文名稱:PDHα ELISA Kit補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體包裝1g

            酮羧化(PC)elisa試劑盒英文名稱:PC ELISA KitCD44抗體包裝25g

            糖磷異構(gòu)1(TPI1)elisa試劑盒英文名稱:TPI1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框114抗體包裝5g

            別孕烯酮(AP)elisa試劑盒英文名稱:AP ELISA KitCD8β鏈(CD8-β)抗體包裝100mg

            表皮轉(zhuǎn)谷酰胺(TGM3)elisa試劑盒英文名稱:TGM3 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框1抗體包裝25g

            表皮調(diào)節(jié)(EREG)elisa試劑盒英文名稱:EREG ELISA Kitγ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體包裝5g

            表皮生長(zhǎng)因子受體2(EGFR2)elisa試劑盒英文名稱:EGFR2 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框72抗體包裝25g

            表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)elisa試劑盒英文名稱:SPD ELISA Kit鈣粘附分子10抗體包裝5g

            表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)elisa試劑盒英文名稱:SPA ELISA KitR Cadherin/CDH4包裝25g

            表睪酮(ET)elisa試劑盒英文名稱:ET ELISA Kit大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體包裝5g

            蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR幽門螺旋菌IgG試劑盒乙酰蝙蝠葛蘇林堿;O-diacetyld

            大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品幽門螺旋桿菌IgM試劑盒一葉萩堿;Securinine

            膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR硬骨試劑盒異葒草; Homoorientin
            細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)乙二胺四乙

            其他 四乙二基乙烯;托立龍;四乙二基乙烯;維爾烯;乙底;依地

            英文名稱: EDTA

            其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid;Edetic acid;(Ethylenedinitrilo)tetraacetic acid;Edathamil

            產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5%

            包裝:250克

            CAS號(hào):60-00-4

            C10H16N2O8=292.25

            級(jí)別:AR

            含量:≥99.5%

            硫鹽:≤0.05%

            碳鈉溶液溶解試驗(yàn):合格

            氯化物:≤0.05%

            鐵:≤0.001%

            重金屬:≤0.001%

            灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%

            性狀:粉末。溶于氫氧化鈉、碳鈉和溶液中,溶于160份沸水,微溶于冷水,不溶于乙和一般有機(jī)溶劑。能與堿金屬、稀土元和過渡金屬等形成極穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。熔點(diǎn) 240℃(分解)。有刺激性

            用途:生化研究。絡(luò)合劑。血液抗凝劑。生化研究中消除重金屬對(duì)催化反應(yīng)的抑制作用。洗滌劑。掩蔽劑

            保存:RT

            操作規(guī)程:

            1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

            2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。

            3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

            4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

            5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

            6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

            7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

            8、結(jié)果分析

            a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00

            b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

             


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