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            上海邦景實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>>人口腔黏膜成纖維細胞

            人口腔黏膜成纖維細胞

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2023-04-21 12:33:51瀏覽次數:288

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            產品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實驗 組織來源 口腔黏膜組織
            人口腔黏膜成纖維細胞的相關產品:TC-1小鼠肺上皮細胞小鼠細胞系1×106TCMK-1小鼠腎小管上皮細胞小鼠細胞系1×106TM3小鼠睪丸間質細胞小鼠細胞系1×106TM4正常小鼠睪丸Sertoli細胞小鼠細胞系1×106U14小鼠子宮頸癌細胞小鼠細胞系1×106

            詳細介紹

            商品詳細介紹:

            4.細胞簡介:

            分離自口腔黏膜組織;口腔各壁都有黏膜覆蓋,口腔黏膜在組織學上由上皮和固有層組成,并借黏膜下層與深部組織相連??谇火つさ那胺脚c唇部皮膚相連,后面與咽部黏膜相延續(xù),是消化道的前端,因此其結構和功能具有皮膚和消化道黏膜的某些特點。人口腔黏膜成纖維細胞主要來自口腔黏膜固有層組織。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

            5.方法簡介:

            實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質量檢測:

            實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長特性  貼壁

            細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

            傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

            消化液  0.25%胰dan白

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            產品屬性:

            產品名稱

            規(guī)格

            組織來源

            人口腔黏膜成纖維細胞

            5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

            口腔黏膜組織

            1.png

            實驗報告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
               2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
               5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            Snail蛋白抗體 細胞質膜微囊蛋白-3封閉多肽 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒

            蛋白酪氨磷-1B抗體 促微管蛋白聚合蛋白家族成員2封閉多肽 小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒ELISA

            肝細胞粘附分子抗體 NKAPL蛋白封閉多肽 小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA檢測試劑盒

            脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 磷脂磷2b封閉多肽 小鼠解整合樣金屬9(ADAM9)elisa試劑盒

            磷化原癌基因RAF1抗體 同源異型盒基因HOXA5蛋白封閉多肽 小鼠氧化型(GSGS)試劑盒elisa

            G蛋白轉錄因子α3抗體 睪丸特異定蛋白質編碼Y1封閉多肽 小鼠還原型(GSH)檢測試劑盒elisa

            粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3抗體 缺氧誘導因子脯氨酰羥化4封閉多肽 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒

            表皮生長因子受體5抗體 防御β-121/β-defensin 121封閉多肽 小鼠c-fos試劑盒ELISA

            英文名稱: NF-L 胰島樣肽5封閉多肽 小鼠c-junELISA檢測試劑盒

            二脂酰甘油?;D移抗體 活化半胱胺蛋白-2封閉多肽  小鼠抗透明帶抗體(aZP)elisa試劑盒

            嗜粒細胞趨化因子/蛋白/Eotaxin抗體 G氨基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)試劑盒elisa

            分泌和跨膜蛋白1抗體 酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1封閉多肽 小鼠嗜性粒細胞陽離子蛋白(ECP)檢測試劑盒elisa

            微管相關蛋白Tau-4抗體 重組人CD105蛋白 小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒

            泛樣蛋白特異性2抗體 整合β1結合蛋白2封閉多肽 小鼠D-乳脫氫(D-LDH)試劑盒ELISA

            N-鈣粘附分子抗體 CD4封閉多肽 小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA檢測試劑盒

            枯草桿菌同工1抗體 TP53調節(jié)激封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)elisa試劑盒

            單羧轉運蛋白-1抗體 金屬磷酯1封閉多肽 小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒elisa

            轉錄因子SOX10抗體 磷化細胞間粘附分子1封閉多肽 小鼠(LZM)檢測試劑盒elisa
            人口腔黏膜成纖維細胞AC16人心肌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AC16細胞專用培養(yǎng)基500ML

            ACHN人腎腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ACHN細胞專用培養(yǎng)基125ML

            ACHN人腎腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ACHN細胞專用培養(yǎng)基500ML

            AGS人胃腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AGS細胞專用培養(yǎng)基125ML

            AGS人胃腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AGS細胞專用培養(yǎng)基500ML

            ARPE-19人視網膜色上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ARPE-19細胞專用培養(yǎng)基125ML

            ARPE-19人視網膜色上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ARPE-19細胞專用培養(yǎng)基500ML
            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
            1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
            二.細胞處理:
            1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
            2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

             


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