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            人角膜內(nèi)皮細(xì)胞

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            更新時(shí)間:2023-04-21 11:14:48瀏覽次數(shù):257

            聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 眼角膜組織
            人角膜內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HS746T人胃癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HSF(SV40)人真皮成纖維細(xì)胞(原代細(xì)胞永生化)人細(xì)胞系1×106HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HT-1376人膀胱癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

            詳細(xì)介紹

            商品詳細(xì)介紹:

            4.細(xì)胞簡介:

            分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂,常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過Na+-K+-ATP活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實(shí)質(zhì)層相對脫水狀態(tài),維持透明性。

            5.方法簡介:

            實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測:

            實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長特性  貼壁

            細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

            傳代特性  可傳2-3代

            消化液  0.25%胰dan白

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            組織來源

            人角膜內(nèi)皮細(xì)胞

            5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            眼角膜組織

            1.png

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
               2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
               5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            微管相關(guān)蛋白4抗體 接觸蛋白相關(guān)蛋白3封閉多肽 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒

            中心體蛋白1抗體 陽離子通道精子相關(guān)蛋白4封閉多肽 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒ELISA

            乙?;M蛋白H4抗體 Ras相關(guān)雌激調(diào)節(jié)生長抑制蛋白封閉多肽 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA檢測試劑盒

            英文名稱: Cyclin E1 重組人軟骨蛋白聚糖 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)elisa試劑盒

            鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 His Tag多肽 人抗SS-B/La抗體試劑盒elisa

            血管生成受體2抗體 核過渡蛋白2封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF)檢測試劑盒elisa

            半胱氨8抗體 轉(zhuǎn)胺4封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA試劑盒

            睪丸蛋白聚糖2抗體 磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)試劑盒ELISA

            細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 甲狀腺激受體相互作用15封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA檢測試劑盒

            英文名稱: URI1 乳腺癌抑癌蛋白封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa試劑盒

            前列腺E2受體2抗體 鈣依賴分泌激活蛋白1封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒elisa

            趨化因子受體1抗體 肝細(xì)胞生長因子受體封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒elisa

            雄激結(jié)合蛋白抗體 雞IgY 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒

            跨膜受體蛋白Notch-1抗體 延伸因子4封閉多肽 人沙眼衣原體(CT)試劑盒ELISA

            溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族39成員A13抗體 補(bǔ)體C4b-A蛋白封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA檢測試劑盒

            硫軟骨2抗體 天冬氨-胱氨特異性家族1 P20封閉多肽 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)elisa試劑盒

            C型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體 磷化細(xì)胞核因子封閉多肽 人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)試劑盒elisa

            腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 跨膜蛋白111封閉多肽 人綠膿桿菌外毒A(PEA)檢測試劑盒elisa
            人角膜內(nèi)皮細(xì)胞LX-2人肝星形細(xì)胞英文名稱:LX-21×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

            LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP英文名稱:LX-2+GFP1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供LX-2鑒定報(bào)告

            Mahlavu 人肝癌細(xì)胞英文名稱:Mahlavu 1×106DMEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

            MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞英文名稱:MCF-10A1×106MEGM kit(五管因子)+100ng/ml霍亂毒(終止消化用刀豆)+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

            MCF-7人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:MCF-71×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

            MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細(xì)胞英文名稱:MCF-7/Adr1×1061640+10%FBS+1%PS+500ng/mL ADR提供STR鑒定報(bào)告

            MCF-7+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:MCF-7+luc1×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供MCF-7細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
            二.細(xì)胞處理:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

             


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