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            禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒

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            • 禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒

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            更新時(shí)間:2023-04-06 15:14:59瀏覽次數(shù):213

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
            英文名稱 Avian Pox virus(=Fowl Pox Virus、FPV)PCR 規(guī)格 50T
            分類 PCR檢測(cè)試劑盒 保存條件 -20℃避光保存
            禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:邊緣無(wú)漿體(無(wú)形體)染料法熒光定量PCR試劑盒小孢子酒曲菌染料法熒光定量PCR試劑盒豬托克特諾病毒1型(豬細(xì)環(huán)病毒1型)染料法熒光定量PCR試劑盒禽正呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒流感病毒N8亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

            詳細(xì)介紹

            實(shí)驗(yàn)外包:

            1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

            2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

            3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

            4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

            5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、熒光、ELISA

            6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選

            7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

            8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
            產(chǎn)品屬性:
            產(chǎn)品名稱:禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒
            英文名稱:Avian Pox virus(=Fowl Pox Virus、FPV)PCR

            規(guī)格:50T

            分類:PCR檢測(cè)試劑盒

            儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

            公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
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            9.jpg

            PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

            方法

            1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

            10×PCR buffer

            5 μl     dNTP mix (2mM)

            4 μl     引物1(10pM)

            2 μl     引物2(10pM)

            2 μl     Taq酶 (2U/μl)

            1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

            1 μl      加ddH2O至 50 μl

            PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

            2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。

            3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

            4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

            使用方法:
            一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
            1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
            2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
            3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
            二、樣品 DNA 的制備
            7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
            8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
            三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
            9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
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