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            大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2023-04-21 11:10:43瀏覽次數(shù):252

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實(shí)驗 組織來源 氣管
            大鼠氣管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HCT15/5Fu人結(jié)直腸癌氟耐藥株人細(xì)胞系1×106HCT-15/Taxol人結(jié)直腸癌耐藥株人細(xì)胞系1×106HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

            詳細(xì)介紹

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            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            組織來源

            大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

            5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            氣管

            商品詳細(xì)介紹:

            4.細(xì)胞簡介:

            分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

            5.方法簡介:

            實(shí)驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測:

            實(shí)驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長特性  貼壁

            細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

            傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

            消化液  0.25%胰dan白

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
            二.細(xì)胞處理:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

            實(shí)驗報告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
               2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
               5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            磷化細(xì)胞角蛋白8抗體 蛋白激Cη封閉多肽 人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒

            胰高血糖受體抗體 分泌型磷脂A2亞基5封閉多肽 人甲狀腺非肽激抗體(THAA)試劑盒ELISA

            巨噬細(xì)胞移動抑制因子抗體 晚期包膜蛋白1封閉多肽 人抗類固醇生成細(xì)胞抗體(SCA)ELISA檢測試劑盒

            英文名稱: Caspase-7 環(huán)指蛋白88封閉多肽 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)elisa試劑盒

            原鈣粘附蛋白20抗體 早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1封閉多肽 人抗信號識別顆??贵w(SRP)試劑盒elisa

            Kruppel樣因子抗體 己醛醣鹽水解酵封閉多肽 人封閉抗體(BA)檢測試劑盒elisa

            磷化熱休克蛋白-70抗體 基質(zhì)金屬-1封閉多肽 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒

            過氧化4抗體 E4F轉(zhuǎn)錄因子1封閉多肽 人抗鈣抑抗體(ACAST-DⅣ)ELISAit高試劑盒ELISA

            白介2受體a鏈/IL-2RA抗體 亮氨拉鏈蛋白封閉多肽 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測試劑盒

            TSN蛋白抗體 趨化樣因子超家族成員3封閉多肽 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa試劑盒

            骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 瞬時受體電位陽離子通道亞家族M成員1封閉多肽 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒elisa

            核苷腺苷轉(zhuǎn)移1抗體 乙型肝炎病毒X蛋白HBX封閉多肽 人抗抗體(GM1)檢測試劑盒elisa

            α-L巖藻糖苷2抗體 脫氫肽1封閉多肽 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒

            信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體 選擇性剪接因子3亞基3封閉多肽 人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒ELISA

            Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體 中心體蛋白27封閉多肽 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA檢測試劑盒

            巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 KLHDC8B蛋白封閉多肽 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)elisa試劑盒

            Rho相關(guān)蛋白激1抗體 冷休克結(jié)構(gòu)域蛋白C2封閉多肽 人抗胰島受體抗體(AIRA)試劑盒elisa

            γ氨基丁運(yùn)載蛋白3抗體 精氨加壓受體2封閉多肽 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)檢測試劑盒elisa
            大鼠氣管平滑肌細(xì)胞HUCCT1人膽管癌細(xì)胞英文名稱:HUCCT11×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

            HUH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱:HUH-61×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

            huh-7人肝癌細(xì)胞英文名稱:huh-71×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

            huh-7.5.1人肝癌細(xì)胞英文名稱:huh-7.5.11×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供HUH-7細(xì)胞STR鑒定報告

            HUT-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:HUT-781×106IMDM+20%FBS+1%PS 提供STR鑒定報告

            HUTU-80人十二脂腸腺癌英文名稱:HUTU-801×106MEM+10%FBS+1%P/S   提供STR鑒定報告

            HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞永生化)英文名稱:HUVEC1×106內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系提供免疫熒光鑒定報告


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