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            兔角膜上皮細(xì)胞

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            • 兔角膜上皮細(xì)胞

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            更新時(shí)間:2023-04-21 10:59:38瀏覽次數(shù):316

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 角膜組織
            兔角膜上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106CW-2人結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106cx-1結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

            詳細(xì)介紹

            商品詳細(xì)介紹:

            4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

            分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒(méi)有血管,透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。其主要功能如下:①角膜是的無(wú)血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,分三層細(xì)胞層,外層即是上皮細(xì)胞;②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫,能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng);③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段,常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。

            5.方法簡(jiǎn)介:

            實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化結(jié)合上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測(cè):

            實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長(zhǎng)特性  貼壁

            細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

            傳代特性  可傳1-3代

            消化液  0.25%胰dan白

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱(chēng)

            規(guī)格

            組織來(lái)源

            兔角膜上皮細(xì)胞

            5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            角膜組織

            1.png

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
               2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
               5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            磷化粘著斑激抗體 癌/睪丸抗原11.9封閉多肽 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒

            細(xì)胞S期激相關(guān)蛋白2抗體 表皮生長(zhǎng)因子封閉多肽 人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)試劑盒ELISA

            羥類(lèi)固醇脫氫17β3抗體 E3連接MMS21蛋白封閉多肽 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA檢測(cè)試劑盒

            TATA結(jié)合蛋白抗體 RH血型C糖蛋白封閉多肽 人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)elisa試劑盒

            轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體 CD13氨肽N封閉多肽 人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒elisa

            磷化真核翻譯起始因子4B抗體 磷化二氫嘧啶樣2(CRMP2/DPYL2)封閉多肽 人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)檢測(cè)試劑盒elisa

            磷化脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體 磷化絲氨/蘇氨蛋白激MST4,MST3,STK25封閉多肽 人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒

            腺苷脫氨(ADA)抗體 免疫球蛋白j鏈封閉多肽 人窖蛋白(Cav-1)試劑盒ELISA

            多巴胺受體D2抗體 高遷移率核小體結(jié)合蛋白1封閉多肽+O16445 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA檢測(cè)試劑盒

            去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體 跨膜蛋白16C封閉多肽 人黑色細(xì)胞刺激(MSH)elisa試劑盒

            整合αX抗體 溶質(zhì)攜帶物家族-1封閉多肽 人表皮角蛋白(EK)試劑盒elisa

            磷化磷酯Cγ2抗體 過(guò)氧化1封閉多肽+O16209 人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)檢測(cè)試劑盒elisa

            內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子1抗體 羧肽X(M14家族1)封閉多肽 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒

            英文名稱(chēng): phospho-GSK3 Alpha + Beta (Tyr279+Tyr216) 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)試劑盒ELISA

            2-二醇脫氫抗體 人乳頭瘤病毒16型E7封閉多肽 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA檢測(cè)試劑盒

            鈣依賴(lài)膜結(jié)合蛋白Copine蛋白1抗體 生物標(biāo)記重組 Spike RBD 人中性粒細(xì)胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)elisa試劑盒

            細(xì)胞凋亡水解樣蛋白1抗體 鋅指蛋白433封閉多肽 人非小細(xì)胞肺癌抗原(LTA)試劑盒elisa

            堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/FGF2抗體 組蛋白H3賴(lài)氨9甲基化1C封閉多肽 人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)檢測(cè)試劑盒elisa
            兔角膜上皮細(xì)胞GM12878人B淋巴細(xì)胞英文名稱(chēng):GM128781×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

            GS-HEPG2人肝癌細(xì)胞亞型(過(guò)表達(dá)谷氨酰氨合成)英文名稱(chēng):GS-HEPG21×106MEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

            H9/HTLV-IIIB人T淋巴瘤白血病細(xì)胞英文名稱(chēng):H9/HTLV-IIIB1×1061640+10%FBS+1% L- +1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

            h9 Feeder Frec人胚胎干細(xì)胞H9   (WA09)英文名稱(chēng):h9 Feeder Frec1×106培養(yǎng)基500ml++細(xì)胞消化液500ml+復(fù)蘇專(zhuān)用因子1mg+matrix基質(zhì)膠5ML提供STR鑒定報(bào)告

            H1人胚胎干細(xì)胞H1   (WA01)英文名稱(chēng):H11×106培養(yǎng)基500ml++細(xì)胞消化液500ml+復(fù)蘇專(zhuān)用因子1mg+matrix基質(zhì)膠5ML提供STR鑒定報(bào)告

            hacat人永生化表皮細(xì)胞英文名稱(chēng):hacat1×106DMEM+10%FBS+1%PS提供STR鑒定報(bào)告

            HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱(chēng):HACAT+LUC1×106DMEM+10%FBS+1%PS提供HACAT細(xì)胞STR鑒定報(bào)告
            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
            二.細(xì)胞處理:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

             


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