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            小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞

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            更新時間:2023-04-21 10:53:08瀏覽次數(shù):320

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實驗 組織來源 視網(wǎng)膜組織
            小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞人細胞系1×106AsPC-1/GEM人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞吉西他濱耐藥株人細胞系1×106AV3人宮頸癌細胞人細胞系1×106BALL-1人B淋巴細胞白血病細胞人細胞系1×106BCPaP人甲狀腺癌細胞人細胞系1×106

            詳細介紹

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            組織來源

            小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞

            5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

            視網(wǎng)膜組織

            商品詳細介紹:

            4.細胞簡介:

            分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構(gòu)成,排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與視循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側(cè)面滑動,以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。

            5.方法簡介:

            實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測:

            實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長特性  貼壁

            細胞形態(tài)  上皮細胞樣

            傳代特性  可傳1-2代

            消化液  0.25%胰dan白

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            1.png

            實驗報告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
               2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
               5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
            1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
            二.細胞處理:
            1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
            2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

            鋅指蛋白198抗體 內(nèi)皮粘蛋白EMCN封閉多肽 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒

            腫瘤免疫表征分析抗體套裝 腫瘤抑制基因p63α封閉多肽 人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒ELISA

            磷酯-2Ac抗體 4號染色體開放閱讀框33封閉多肽 人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA檢測試劑盒

            原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體 磷化p21激活激6封閉多肽 人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒

            腫瘤/睪丸抗原家族104成員3抗體 分泌載體膜蛋白3封閉多肽 人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒elisa

            環(huán)指蛋白20抗體 嗜鉻粒B封閉多肽 人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒elisa

            英文名稱: PDPK1 細胞色cP450 CYP26A1封閉多肽 人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒

            英文名稱: MUC6 磷化細胞分化周期CDC42蛋白封閉多肽 人可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒ELISA

            膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 N-鈣粘附分子封閉多肽 人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA檢測試劑盒

            轉(zhuǎn)錄因子家族ETS1抗體 脫氧胞苷脫氨蛋白封閉多肽 人P選擇(P-Selectin/CD62P/GMP140)elisa試劑盒

            英文名稱: Thyroid Transcription Factor-1 生長抑制因子基因1封閉多肽 人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒elisa

            視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體 磷化雌激反應(yīng)指狀蛋白封閉多肽 人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)檢測試劑盒elisa

            組織相容性復(fù)合體蛋白2(HLA-DMB)抗體 補體C3b-α鏈封閉多肽 人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒

            補體因子D抗體 GSH2蛋白封閉多肽 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)試劑盒ELISA

            整合連接激-1抗體 RALYL蛋白封閉多肽 人的神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA檢測試劑盒

            磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體 ZSWIM6蛋白封閉多肽 人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa試劑盒

            微管蛋白β3抗體 絲氨tRNA連接封閉多肽 人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒elisa

            磷化蛋白激C亞性D型抗體 動力蛋白激活蛋白2封閉多肽 人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)檢測試劑盒elisa
            小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞BT-549人乳腺導(dǎo)管癌細胞英文名稱:BT-5491×1061640+10%FBS+0.01mg/ml胰島 +1%P/S提供STR鑒定報告

            BT-B人宮頸癌細胞英文名稱:BT-B1×1061640+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報告

            BxPC-3人原位胰腺腺癌細胞英文名稱:BxPC-31×1061640+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

            C666-1人鼻咽癌細胞英文名稱:C666-11×1061640+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報告

            C-33A人宮頸癌細胞英文名稱:C-33A1×106 MEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

            Caco-2人結(jié)腸腺癌細胞英文名稱:Caco-21×106MEM+20%FBS+1%NEAA+1%P/S 提供STR鑒定報告

            CAL-27人舌鱗癌細胞英文名稱:CAL-271×106DMEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報告

             


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