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            人骨髓造血干細(xì)胞

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            更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):551

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
            主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓組織
            人骨髓造血干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔腎小球內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎足細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔輸尿管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔輸尿管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔膀胱上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

            詳細(xì)介紹

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            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            組織來(lái)源

            人骨髓造血干細(xì)胞

            5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            骨髓組織

            商品詳細(xì)介紹:

            4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

            分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細(xì)胞具有自我更新能力并能分化為各種血細(xì)胞的前提細(xì)胞,終生成各種血細(xì)胞成分,包括紅細(xì)胞,白細(xì)胞和血小板。造血干細(xì)胞需要根據(jù)機(jī)體的生理需求適時(shí)的補(bǔ)充血液系統(tǒng)各個(gè)成熟細(xì)胞組分。同時(shí)在損傷、炎癥等應(yīng)激狀態(tài)下,造血干細(xì)胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個(gè)細(xì)胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細(xì)胞移植廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實(shí)體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細(xì)胞瘤,乳腺癌,小細(xì)胞肺癌,主要應(yīng)用于常規(guī)治療失敗或復(fù)發(fā)難治以及具有不良預(yù)后因素的患者。造血干細(xì)胞以不對(duì)稱有絲分裂方式進(jìn)行增殖,一個(gè)干細(xì)胞分裂產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞,一個(gè)分化為造血祖細(xì)胞,另一個(gè)則保持干細(xì)胞特征。造血干細(xì)胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細(xì)胞同時(shí),保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,造血干細(xì)胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右。 造血干細(xì)胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細(xì)胞),缺少滋養(yǎng)層細(xì)胞不增殖,無(wú)法長(zhǎng)期培養(yǎng),本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細(xì)胞灌裝發(fā)貨,不包含滋養(yǎng)層,因此收貨后建議盡快實(shí)驗(yàn)。

            5.方法簡(jiǎn)介:

            實(shí)驗(yàn)室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測(cè):

            實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基  FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等

            換液頻率    2-3天換液一次

            生長(zhǎng)特性  懸浮

            細(xì)胞形態(tài)  圓形

            傳代特性  不建議傳代

            消化液  

            培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

            操作規(guī)程:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
            二.細(xì)胞處理:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

            一、分離與培養(yǎng):

            二、免疫熒光鑒定:


               1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
               2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
               3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
               4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
               5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

             

            1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
               2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
               3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
               4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
               5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
               6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

            脫氫激亞型2抗體 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)抗原5封閉多肽 

            促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子/促腎上皮質(zhì)激釋放激抗體 SYF2蛋白封閉多肽 

            D型多巴色脫羧抗體 突觸相關(guān)蛋白23封閉多肽 

            CD10單克隆抗體 9號(hào)染色體開放閱讀框66封閉多肽 

            二?;视王;D(zhuǎn)移2樣蛋白6抗體 組胺雞卵白蛋白偶聯(lián)物 

            促甲狀腺受體抗體(C端) 乙?;D(zhuǎn)移10封閉多肽 

            核自身抗原SP140抗體 原癌基因AF4蛋白封閉多肽 

            SAPS結(jié)構(gòu)域家族3抗體 酪氨羥化封閉多肽 

            鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 RNA結(jié)合蛋白35A封閉多肽 

            ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗體 過(guò)氧化物體生成蛋白5相關(guān)蛋白封閉多肽 

            Cy3標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體 延胡索酰乙酰乙水解封閉多肽 

            還原型輔Ⅱ氧化5/腺嘌呤二核苷磷抗體 軸突蛋白5封閉多肽 

            舞蹈癥相關(guān)蛋白40/8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體 重組小鼠FcRn蛋白 

            早老蛋白-1抗體 卵泡刺激結(jié)合蛋白1封閉多肽 

            eIF4H蛋白抗體 解旋樣轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 

            乳腺癌易感基因1抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白48封閉多肽 

            退行性精母細(xì)胞同源物1抗體 MAGOH蛋白封閉多肽 

            DEK癌基因結(jié)合蛋白 基質(zhì)金屬-26封閉多肽 
            人骨髓造血干細(xì)胞GMEM (Glasgows MEM)500mL-

            Ham's F-12500mL-

            Ham's F-12K(不含L-)500mL-

            小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠子宮成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠子宮成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠子宮成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

            SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

            大鼠睪丸支持細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠睪丸支持細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠睪丸支持細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠睪丸支持細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠睪丸支持細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

            22RV1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×422RV1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持22RV1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含22RV1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于22RV1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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