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標記細胞膜及脂溶性生物結構菁類染料DiR,DiI, DiO, DiD
閱讀：977 發(fā)布時間：2021-4-29DiI, DiO, DiD和DiR作為一類長鏈的親脂性二烷基碳菁類染料（Dialkylcarbocyanines）熒光染料家族，用于標記細胞膜以及其他脂溶性生物結構。作為一類環(huán)境敏感型熒光染料，當它們與膜結合或者與親脂性生物分子（例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強度很弱）結合時，其熒光強度顯著增強。一旦進入細胞后，它們在細胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴散，于最佳濃度條件下可將整個細胞均勻染色。這些染料具很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。
四種染料呈現(xiàn)不同的熒光顏色，DiI（橙色熒光）DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術提供了一種便捷的工具。DiO和DiI分別用標準FITC和TRITC濾光器檢測，可結合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激發(fā)，具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長，特別適合用于標記具本底熒光的細胞和組織。而DiR在體內(nèi)活體成像或者示蹤中意義非凡，因其所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，并且在紅外光范圍內(nèi)，其本底熒光水平很低。
本品以DiR的碘鹽形式提供，
英文名：1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaineiodide，
純度≥95%，適用于熒光檢測研究。
溫馨提示：本產(chǎn)品由陜西新研博美生物科技有限公司提供，該產(chǎn)品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究。
廠 家：陜西新研博美生物科技有限公司
請點擊此處進入陜西新研博美生物科技有限公司展臺查看
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使用方法：
1、染色液制備：
（1）配置DMSO 或 EtOH 儲存液：儲存液用 DMSO 或 EtOH 配置濃度 1～5 mM。
注：未使用的儲存液分裝儲存在-20℃，避免反復凍融。
（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS 或 PBS）稀釋儲存液，配制濃度為 1～5μM 的工作液。
注：工作液最終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。 建議從推薦濃度的 10 倍范圍內(nèi)開始*濃度的摸索。
2、懸浮細胞染色：
（1）加入適當體積的染色工作液重懸細胞，使其密度為 1×10 6 /mL。
（2）37℃ 孵育細胞 2～20 min，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間 不同?？梢?0 min 作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得 到均一的標記結果。
（3）孵育結束，1000～1500 rpm離心5 min。傾倒上清液， 再次緩慢加入37 ℃預熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。
（4）重復步驟（3）兩次以上。
3、貼壁細胞的染色：
（1）將貼壁細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。
（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，但表面要 保持濕潤。
（3）在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，輕輕晃動 使染料均勻覆蓋所有細胞。
（4）37℃ 孵育細胞 2～20 min，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同?？梢?0 min作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標記結果。
（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片 2～3 次，每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞，孵育5～10 min，然后吸干培養(yǎng)基。但要使表面保持濕潤。
溫馨提示：本產(chǎn)品由陜西新研博美生物科技有限公司提供，該產(chǎn)品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究。
純 度：95%
儲存/保存方法：−20°C干燥避光保存，產(chǎn)品有效期為12個月
技術指標：
Ex(nm)：748
Em(nm)：780
注意事項：
1、熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
基本信息：
別 名：細胞膜熒光探針DiR, DiR細胞膜染料, DiR 碘化物；DiIC18(7)
外 觀：藍色至深藍色油狀固體
可溶性/溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇
參考文獻：Cheng Z, et al. (2004). Differential control over postganglionic neurons in rat cardiac ganglia by NA and DmnX neurons: anatomical evidence. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286, R625-33; Koo YE, et al. (2004). Real-time measurements of dissolved ox
分子結構圖：
DiR 結構式