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            技術(shù)文章

            MAL-Cy5,1437872-46-2水溶性較低

            閱讀:178          發(fā)布時(shí)間:2022-6-8

            Cy5 (Cyanine 5) 是一種發(fā)遠(yuǎn)紅(far-red)熒光的花青素?zé)晒馊玖稀K南庀禂?shù)很高,熒光很亮,并且對(duì)pH不敏感,一般可以用633 nm或647 nm的激光束激發(fā)然后用 Cy5或APC濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy5熒光落在遠(yuǎn)紅光區(qū),使用Cy5或者其它遠(yuǎn)紅光染料的一個(gè)重要優(yōu)勢(shì)是在這個(gè)長(zhǎng)波長(zhǎng)光譜范圍內(nèi)樣品背景熒光較低,而在這個(gè)區(qū)域CCD相機(jī)/檢測(cè)器檢測(cè)靈敏度。Cy5可以用來標(biāo)記蛋白,抗體,多肽,核酸分子,納米粒等。

            馬來酰亞胺(maleimide)是生物標(biāo)記反應(yīng)中常用的基團(tuán),它可以和巰基(-SH)通過親和加成反應(yīng)生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結(jié)構(gòu)從而實(shí)現(xiàn)標(biāo)記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側(cè)鏈)也有親和性,但在中性或微酸性緩沖液中,馬來酰亞胺選擇性標(biāo)記巰基(反應(yīng)速度比胺基快>1000倍)。標(biāo)記反應(yīng)反應(yīng)迅速,選擇性高,產(chǎn)率好,另外,巰基是一種在生物分子中***存在的官能團(tuán),比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等,因此馬來酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標(biāo)記已成為僅次于NHS/胺基標(biāo)記的***常用生物連接反應(yīng)(bioconjugation)。

            Cy5-馬來酰亞胺的水溶性較低,所以在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)需要使用有機(jī)共溶劑,常用有機(jī)溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等。如需標(biāo)記的分子對(duì)有機(jī)溶劑敏感,可選擇磺化花青素(sulfonated cyanine),即磺化Cy5-馬來酰亞胺。兩者的光譜性質(zhì)幾乎一致,因此大部分應(yīng)用可相互替換。兩者的主要區(qū)別在于:磺化染料是水溶性的,在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)不需要使用有機(jī)共溶劑,并且降低染料在水中聚集的可能性,增強(qiáng)標(biāo)記效率。

            Cy5-馬來酰亞胺標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是640/664nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 647,DyLight 649,ATTO 647等。


            英文名:Cyanine5 maleimide

            cy5-MAL

            MAL-Cy5

            中文名:花青素CY5-馬來酰亞胺

            CAS號(hào):1437872-46-2(無陰離子)

            分子式:C38H45N4O3

            分子量:605.8


            外觀:深藍(lán)色固體

            純度:95%溶解性:溶于有機(jī)溶劑(DMF、DMSO、二氯甲烷),幾乎不溶于水(31μm,23 mg/L)

            儲(chǔ)存條件:-20°C避光避濕

            注意事項(xiàng):

            1)Cy5-馬來酰亞胺水溶性較低,標(biāo)記反應(yīng)可在有機(jī)溶劑中進(jìn)行或者含有機(jī)助溶劑的水相中進(jìn)行。

            2)天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在,在馬來酰亞胺標(biāo)記前,務(wù)*還原劑(如DTT,TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。

            3)馬來酰亞胺也可以和疊氮化合物反應(yīng),應(yīng)避免疊氮官能團(tuán)。

            4)標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下,因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂泊(photobleaching)。

            相關(guān)化合物:

            Cyanine5 maleimide

            1437796-65-0

            Sulfo-Cyanine5 maleimide

            2242791-82-6

            Cyanine5 amine

            1807589-58-7

            Cyanine5 azide (DMSO solution)

            1267539-32-1

            Cyanine5 carboxylic acid chloride

            1032678-07-1

            Cyanine5 alkyne

            1223357-57-0

            Cyanine5 NHS ester chloride

            1032678-42-4

            Cyanine5 DBCO

            2182601-71-2

            Cyanine5.5 maleimide

            1594414-90-0

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