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            如何提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率

            2022-8-2  閱讀(312)

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              細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可用于免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞和各類細(xì)胞系中,其不依賴于病毒感染、不依賴于細(xì)胞有絲分裂,可加快基因表達(dá),已成功轉(zhuǎn)染1200余種細(xì)胞系、130余種原代細(xì)胞,多數(shù)細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50-70%,部分原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。目前,LONZA4D-Nucleofector已應(yīng)用于CAR-T細(xì)胞的研究中。
              轉(zhuǎn)染效率高,在經(jīng)典的電穿孔技術(shù)上,配合高效率細(xì)胞轉(zhuǎn)染液,可實(shí)現(xiàn)無語倫比的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率,尤其是針對(duì)一些原代細(xì)胞、干細(xì)胞和難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系??蛇_(dá)99%,低在40%以上。
              為提高細(xì)胞核轉(zhuǎn)染效率,優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件不可少,相比其他品牌,LONZA可提供共享的數(shù)據(jù)庫,可檢索到700種以上的細(xì)胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)和操作手冊(cè),除轉(zhuǎn)染操作指導(dǎo)外,還提供細(xì)胞來源、傳代、生長條件、培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞培養(yǎng)基等各類技巧,大大節(jié)省摸索時(shí)間和試劑耗材損耗。
              細(xì)胞轉(zhuǎn)染做的好不好除了受轉(zhuǎn)染方法的影響外,還有很多別的影響因素,像細(xì)胞狀態(tài)和密度、培養(yǎng)基、載體大小等多方面因素都會(huì)影響到我們的轉(zhuǎn)染效率,所以細(xì)胞轉(zhuǎn)染是一個(gè)常見但是卻并不簡單的實(shí)驗(yàn),盡管如此,我們還是要努力追求理想的細(xì)胞轉(zhuǎn)染原則——轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小、重復(fù)性好、安全、方法簡單、省時(shí)、經(jīng)濟(jì)。

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