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工欲善其事必先利其器，生物制藥從前期藥物靶點確認(rèn)，高通量篩選，藥物優(yōu)化，活性功能分析，工藝開發(fā)，直至質(zhì)量控制都離不開酶標(biāo)儀這一檢測工具。一款優(yōu)秀的酶標(biāo)儀，在靈敏度，穩(wěn)定性，功能多樣性幾個維度如何平衡和把握呢？

酶標(biāo)儀最常規(guī)的功能包含光吸收，熒光和化學(xué)發(fā)光，這三種應(yīng)用能夠滿足比較基礎(chǔ)的檢測需求。但它們在原理上有著迥異的差別：光吸收是基于光通過物質(zhì)時被吸收的定律進行定性和定量分析；熒光是熒光分子中處于激發(fā)態(tài)的原子核外電子由高能級回到低能級所產(chǎn)生的輻射；化學(xué)發(fā)光的檢測信號是酶促反應(yīng)過程中釋放的光子，不需要激發(fā)光。因此，若想獲取比較好的檢測結(jié)果，三種功能模塊的檢測器需要獨立才是，尤其是化學(xué)發(fā)光，需要獨立于熒光之外的超敏感檢測模式，放大檢測光子信號、減少空間串?dāng)_，才能在實驗中得到更好的檢測窗口。

質(zhì)的飛躍——EnSight超敏化學(xué)發(fā)光

EnSight這款多模式檢測儀最初的設(shè)計理念就是模塊化的光路設(shè)計，不同且獨立的檢測器滿足不同應(yīng)用需求。采用專用超敏感化學(xué)發(fā)光檢測器以及免光纖的光路，在檢測時更靠近檢測樣品，有效避免相鄰樣本的交叉干擾，也更易于捕捉微弱信號，有效區(qū)分背景干擾和樣品信號，相對普通化學(xué)發(fā)光，靈敏度提升10倍，孔間串?dāng)_低0.05%，確保實驗結(jié)果的可靠和準(zhǔn)確。

EnSight超敏化學(xué)發(fā)光檢測光路以及與一般化學(xué)發(fā)光的比較

2020年，中國食品藥品檢定研究院（簡稱中檢院）王佑春團隊在EmergingMicrobes &Infections上發(fā)表了重要論文，本文作者開發(fā)了SARS-CoV-2抗病毒檢測的PBNA(pseudovirus-based neutralization assays)評價方法。首先作者構(gòu)建并滴定SARS-CoV-2假病毒；接著對SARS-CoV-2 PBNA體系進行了優(yōu)化；最終將此PBNA體系可作為疫苗對抑制SARS-CoV-2侵入效果和靶向病毒入侵治療方案的評價方法。

作者全程借助EnSight和Britelite底物進行化學(xué)發(fā)光檢測：

• SARS-CoV-2假病毒構(gòu)建和滴度檢測

• SARS-CoV-2中和反應(yīng)檢測方法的建立和驗證

基于整個檢測系統(tǒng)的高靈敏度和穩(wěn)定性，該方法作為標(biāo)準(zhǔn)SOP下發(fā)各省疾控，同時提供給治療藥物開發(fā)機構(gòu)，以評估候選疫苗或藥物的療效。

SARS-CoV-2 PBNA驗證和工作流程

除了基礎(chǔ)的三功能，要實現(xiàn)更多的檢測應(yīng)用，尤其是藥物研發(fā)階段，具有多功能或可擴展性的酶標(biāo)儀是更好的選擇。

EnSight除具有基本功能高精度四光柵（光吸收、熒光）模塊和超靈敏獨立化學(xué)發(fā)光檢測以外，還可擴展超靈敏度Alpha檢測功能以及高靈敏時間分辨熒光&高兼容性TR-FRET。

Alpha,讓最費時耗力的ELISA得以解放

說起ELISA，可謂是免疫學(xué)中的經(jīng)典實驗，但是做過的小伙伴都知道，過程“耗時耗力"，加樣，甩板子，洗滌，反復(fù)循環(huán)，一次實驗耗費大半天時間。那么，到底怎樣才能實現(xiàn)靈敏度又高，流程又短，省時省力的目標(biāo)蛋白檢測呢？

只需混合無需洗滌的ELISA——Alpha提供解決方案。和ELISA相比，Alpha是為均相檢測，操作十分簡便。可省去費時費力的清洗步驟，無論是總的實驗操作時間，還是試劑準(zhǔn)備時間都被大大縮短。

Alpha檢測須配置高強度的激光光源，以激發(fā)出供體微珠上足量的單體氧分子。EnSight超靈敏HTS Alpha模塊在配置激光光源和超靈敏PMT的基礎(chǔ)上，又對光源和PMT進行了優(yōu)化，因此其信噪比更高、檢測速度更快，得到低背景、高靈敏度的信號。再者，易于實現(xiàn)自動化分液操作，非常適合高通量篩選。

技多不壓身——時間分辨熒光(TRF)

稀土元素在受到熒光激發(fā)時，發(fā)生熒光衰減的周期通常是很長，能達到1-2ms，可以滿足測量要求，因此而產(chǎn)生了時間分辨熒光分析法，即使用長效熒光標(biāo)記物，在關(guān)閉激發(fā)光后再測定熒光強度的分析方法。TRF光信號比普通熒光信號較弱，EnSight采用優(yōu)化的濾光片及專用二向色鏡光路，以盡量保證激發(fā)光強度、光透過率及雜信號干擾，以達到更好的檢測靈敏度和信噪比。

EnSight還是一臺細胞成像分析儀

酶標(biāo)儀一般是通過讀取光強度值這一單一維度來評估樣品信息，但細胞類檢測對數(shù)據(jù)的更高要求，如細胞數(shù)量、生長融合度、細胞形態(tài)和增殖、凋亡水平、病毒空斑實驗等。EnSight十八般武藝，樣樣精通。

EnSight具有高速高效細胞成像模塊，采用先進的sCMOS相機以降低信號背景噪音，激光自動聚焦以快速成像，固態(tài)光源(LED)以進行短時照明。可以依次進行多通道檢測，一整個384孔板整板生成單色圖像只需大約5分鐘。相比人工計數(shù)和分析，可以顯著提高實驗通量以及實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

EnSight 多模式檢測儀進行成像和空斑計數(shù)分析

人工計數(shù)和EnSight計數(shù)的比較

如虎添翼——智能分析軟件

出色的酶標(biāo)檢測結(jié)果，離不開硬件全程保駕護航，同時更需要一個好的軍師——分析軟件。

EnSight基于工作流程的Kaleido數(shù)據(jù)采集和分析軟件方便易學(xué)，其用戶界面會引導(dǎo)實驗進行，更加輕松自如地設(shè)置和運行多技術(shù)流程。用戶可根據(jù)自己的技能水平和熟練程度設(shè)置實驗方案。預(yù)制的方案有助于更快啟動實驗，非常適合新手和日常應(yīng)用。利用該軟件的任務(wù)工具箱，可以將任務(wù)結(jié)合起來創(chuàng)建自定義方案，因此可以在更廣泛的成像應(yīng)用中快速獲取結(jié)果。

集美貌與才華與一身，EnSight多功能酶標(biāo)儀以一種方式將標(biāo)記技術(shù)與微孔板顯微成像技術(shù)整合，為您的研究提供一種真正的正交方法，使您獲得深入見解。