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一，什么是報告基因？
報告基因( reporter gene) 是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質或酶的基因。報告基因與目的基因或調(diào)控序列相連，通過間接或直接檢測報告基因編碼產(chǎn)物的信號，比如報告蛋白、mRNA、酶等，直觀反映細胞內(nèi)基因的轉錄活性或表達水平。一般報告基因的特點是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關注的一個關鍵點。編碼產(chǎn)物半衰期和報告基因的應用領域息息相關。[1]
那么報告基因該如何選擇呢？在選擇報告基因時一般基于以下幾個原則，對宿主的影響，內(nèi)源性活性影響以及方法是否成熟等。目前報告基因大致分為四類[2][3]，不同的報告基因有著不同的優(yōu)缺點（表1）。下面就幾種不同的報告基因做出舉例介紹。
二，報告基因的種類及優(yōu)勢
| 報告基因類別 | 優(yōu)勢 |
| 無底物發(fā)射熒光(如熒光蛋白基因) | 1.相對分子質量小、熒光較穩(wěn)定、對活細胞無害、檢測方法容易; 2.可以在同一個細胞中檢測到綠色熒光蛋白和藍色突變體 |
| 與放射性或熒光底物相互作用（如熒光素酶） | 1.方便快捷，高靈敏度; 2.線性范圍較大，背景極低，分析方法相對簡單。 |
| 轉運為基礎的報告基因（如氯霉素乙酰轉移酶基因） | 1.表達產(chǎn)物比較穩(wěn)定; 2.氯毒素乙酷轉移酶在真核細胞中的本底很低，結果重現(xiàn)性好，且靈敏度高，是真核基因表達調(diào)控研究中最早使用的報告基因之一。 |
| 膜錨定受體或抗體（如膜錨定熒光素酶） | 1.高靈敏度; 2.檢測信號在細胞外不受細胞內(nèi)源物質影響。 |
熒光素酶報告基因
在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報告基因為熒光素酶報告基因。最常見的熒光素酶 （luciferase）基因來源于螢火蟲。螢火蟲螢光素酶在ATP、氧氣和Mg2+存在條件下，催化螢光素的氧化羧化，釋放出光信號，這是任何已知生物發(fā)光系統(tǒng)中效率較高的發(fā)光反應，因而被設計用來檢測和定量哺乳動物細胞中螢火蟲螢光素酶的表達。相對于其他報告基因，螢光素酶具有諸多優(yōu)勢：檢測靈敏度高，型號穩(wěn)定性好，操作方便。
CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性，應用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動子功能測定、信號通路等研究。
逐典螢光素酶報告基因
針對報告基因檢測不同的側重需求，逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。
逐典螢光素酶報告基因特點：
1. 檢測靈敏度高，信號穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩(wěn)定型檢測試劑進行信號檢測。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時在10次反復凍融實驗中，逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩(wěn)定性。
