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D-Luciferin potassium salt中文名為D-螢光素鉀鹽，是受歡迎和通用的生物發(fā)光底物。螢光素酶/螢光素生物發(fā)光系統(tǒng)在螢火蟲(Photinus pyralis)和其他幾種甲蟲中被發(fā)現(xiàn)。熒光素酶通過二氧酮中間體氧化ATP活化的熒光素。螢火蟲熒光素酶通過ATP依賴的氧化熒光素產(chǎn)生光。該反應(yīng)產(chǎn)生的 560nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達到峰值，當(dāng)熒光素和ATP過量時，光輸出與熒光素酶活性成正比。螢火蟲熒光素酶長期以來一直被偶聯(lián)到抗體和使用熒光素作為檢測底物的免疫分析標簽。與辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶相比，熒光素酶對化學(xué)修飾的耐受性較差。在科研領(lǐng)域，D-Luciferin廣泛應(yīng)用于基于螢火蟲螢光素酶的報告基因檢測和動物的活體成像實驗。此外，熒光素酶的另一個重要用途是衛(wèi)生監(jiān)測領(lǐng)域。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染，因為所有生物體中都存在ATP來產(chǎn)生發(fā)光。這種類型的ATP生物發(fā)光的主要應(yīng)用是通過測試食品加工廠的表面來確定設(shè)備或產(chǎn)品是否受到污染來保證質(zhì)量。
體外實驗方法
1.100×螢火蟲熒光素酶底物收到后，若需要多次實驗請分裝，避光保存在-20℃，避免反復(fù)凍融；
2.準備過程：在預(yù)熱過的培養(yǎng)基中制備0.5-1 mM的D-熒光素工作溶液；
3.細胞實驗：正常培養(yǎng)的細胞棄去培養(yǎng)基，加入熒光素工作溶液，37°C下孵育細胞5-10分鐘進行成像實驗。
體內(nèi)成像實驗
1.在DPBS中制備15 mg/mL的熒光素原液，0.22 μm膜過濾保存，現(xiàn)配先用，若保存需避光保存在-20℃，避免反復(fù)凍融。
2.腹腔注射用量：根據(jù)動物體重參考用量為150 mg/kg（或10 μL/g上述制備的原液），參考時間為10-15 min后進行成像。實際操作建議應(yīng)該對每個動物模型進行熒光素的動力學(xué)研究，以確定峰值信號時間。
逐典D-螢光素鉀鹽優(yōu)勢
1.高純度（HPLC驗證純度≥99%)
2.優(yōu)異的生物發(fā)光性能
3.高溶解度（>40mg/ml)
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