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干細胞研究是近年來醫(yī)學和生物學領域中最引人注目的熱點之一?,F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)骨髓中除了造血干細胞以外,還存在一類骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSC),是中胚層發(fā)育的早期細胞。這類細胞可以通過體外貼壁培養(yǎng)加以分離,分化為多種造血以外的組織細胞,特別是中胚層和外胚層來源組織的細胞。
01產(chǎn)品介紹
增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)是埃澤思生物(Applied Cell®)自主研發(fā)的一款無外源動物成分的人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基??蓱糜谌斯撬?、脂肪、臍帶等組織來源的間充質(zhì)干細胞的原代分離、擴增與傳代培養(yǎng),并保持其多向分化潛能。本產(chǎn)品水平遠低于中國藥典標準,生產(chǎn)過程遵循IS09001體系,并符合GMP指導原則。
增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基主要成分:氨基酸,維生素、無機鹽、白蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、微量元素,細胞因子等。

規(guī)格:基礎培養(yǎng)基 490mL,添加劑 10mL
運輸保存條件:基礎培養(yǎng)基2-8℃,添加劑≤-10℃;混合后2-8°C
保質(zhì)期:12個月
02產(chǎn)品優(yōu)勢
1、高效增殖能力、明顯降低單位細胞生產(chǎn)成本;
2、傳代20代,細胞依然保持良好的形態(tài)與分化能力;
3、無動物源,成分確定,可以明顯減少批間差異,確保每一批次產(chǎn)品的高效能和穩(wěn)定性;
4、符合細胞藥物研發(fā)標準,可以進行藥物研發(fā)申報。
03增殖能力
實驗步驟
1、 將6000 cells/cm2 的細胞接種10cm培養(yǎng)皿中,初始細胞數(shù)為3.3x10^5 cells;在37°C,5% CO2的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3天。
2、第三天結(jié)束后,對細胞進行計數(shù),并且將細胞傳至T175 瓶;在37°C,5%CO2的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3天。

實驗結(jié)果
hMSC Medium Plus 在3天內(nèi)顯著提高了細胞增殖率,細胞數(shù)達到4.10 x10^6cells/mL,幾乎是競品2.26x10^6 cells/mL的兩倍。
在傳代后的第六天,hMSC Medium Plus的細胞數(shù)達到1.57x10^7 cells/mL,顯著高于競品的0.96x10^7 cells/mL。
hMSC Medium Plus 展現(xiàn)出細胞增殖能力和傳代效率,能夠在更短時間內(nèi)獲得更多高質(zhì)量的間充質(zhì)干細胞。
這一優(yōu)勢使得hMSC Medium Plus 在干細胞研究和應用中具有顯著的競爭力,適合大規(guī)模生產(chǎn)和高通量實驗。

04穩(wěn)定傳代,持久效能
增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)經(jīng)過嚴格的測試可以穩(wěn)定傳代20代,并且保持著增殖和分化能力。

05流式檢測
CD105是細胞表面I型膜糖蛋白,在細胞遷移方面發(fā)揮重要作用。CD90廣泛表達于各類干細胞的表面,涉及細胞間的粘附、遷移,若細胞貼壁能力缺失或產(chǎn)生接觸抑制,CD90會有明顯下降。
幾種陰性標志物主要為血液類細胞的標志物,MSC不應有所表達。因此,對于高代次的MSC,CD105和CD90若正常表達,一般所有的指標都沒有異常。hMSC Medium Plus能夠穩(wěn)定維持高代次陽性標志物在98%以上。下圖為P12代人臍帶間充質(zhì)干細胞表面標記物的檢測。

06三項分化
hMSC Medium Plus 支持間充質(zhì)干細胞的多項分化能力,包括成脂、成骨和成軟骨分化,為多種研究應用提供強大支持。

hMSC Medium Plus 所培養(yǎng)出的MSC具有增殖能力、可穩(wěn)定傳代、表面標志物及三項分化的穩(wěn)定均顯示出這款培養(yǎng)基產(chǎn)品在MSC基本質(zhì)量中的穩(wěn)定性。