JM110感受態(tài)細(xì)胞

JM110 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:

JM110感受態(tài)細(xì)胞基因型：
rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacI^qlacZΔM15]
JM110感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：
CMbio JM110菌株具有硫酸鏈霉素抗性(StrR) ；是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的質(zhì)粒DNA，可被對(duì)dam、dcm甲基化敏感的內(nèi)切酶切割； lacI^qlacZΔM15的存在使JM110可以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，但轉(zhuǎn)化效率不高，CMbio High5^TM系列JM110感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率約10⁷ cfu/μg。一般不用于質(zhì)粒構(gòu)建，只適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化。
JM110感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：
1、CMbio JM110感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中），加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2、42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
JM110感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1. CMbio  感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。