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禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒
本試劑盒針對禽流感病毒H7N7亞型基因組高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針，在反應(yīng)體系中含禽流感病毒H7N7亞型基因組模板的情況下，PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道信號進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。
產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱：
禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒（雙色實(shí)時熒光PCR法）
一、禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒（雙色實(shí)時熒光PCR法）產(chǎn)品介紹
通用名稱：禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒（雙色實(shí)時熒光PCR法）
英文名稱：Avian Influenza virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
二、包裝規(guī)格 25T/盒、48T/盒、50T/盒
三、預(yù)期用途 本試劑盒適用于禽流感病毒H7N7亞型，不進(jìn)行病毒分型，可用于臨床禽流感病毒H7N7亞型的輔助診斷，但不作確診使用。
四、禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒（雙色實(shí)時熒光PCR法）原理
本試劑盒針對禽流感病毒H7N7亞型基因組高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針，在反應(yīng)體系中含禽流感病毒H7N7亞型基因組模板的情況下，PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道信號進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。
五、禽流感病毒H7N7亞型檢測試劑盒（雙色實(shí)時熒光PCR法）
RT-PCR反應(yīng)液、逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
避光-20℃以下保存，避免反復(fù)凍融，有效期為12個月。
七、適用儀器 ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實(shí)時熒光定量PCR儀。
【參考值（參考范圍）】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
（2）可疑：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
通道及檢測結(jié)果 | 標(biāo)本檢測結(jié)果解釋 |
FAM | |
+ | 標(biāo)本中檢出禽流感病毒H7N7亞型 |
- | 標(biāo)本中未檢出禽流感病毒H7N7亞型 |
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1. 當(dāng)檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的*檢出*可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果。
2. 被檢樣本在采集、運(yùn)輸、儲存以及處理過程中操作方式不當(dāng)容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
3. 樣本在采集、運(yùn)輸、儲存以及處理過程中發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽性結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 產(chǎn)品的*檢出限為102 Copies/mL，產(chǎn)品CV值≤5%。
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)镹G、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。