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細(xì)菌DNA/RNA提取試劑盒的運(yùn)輸條件
動(dòng)物內(nèi)臟、肌肉組織、血液以及培養(yǎng)的細(xì)胞和細(xì)菌等樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下破碎并可使大部分蛋白質(zhì)變性，釋放出基因組DNA。在其所提供的合適的鹽離子和pH環(huán)境的作用下，與乙醇混合后，基因組DNA特異性地結(jié)合于膜上，大部分蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)在兩次洗滌過(guò)程中被洗下，而DNA與膜結(jié)合牢固，在洗脫液的作用下被洗下。
本試劑盒可以從多種樣本中提取基因組DNA，包括動(dòng)物內(nèi)臟、肌肉組織、血液以及培養(yǎng)的細(xì)胞和細(xì)菌等。本法基于對(duì)基因組DNA具有高度選擇性的高分子膜材料，只需幾個(gè)步驟即可完成提取過(guò)程，在30分鐘內(nèi)完成高純度DNA的提取。
本試劑盒提取的DNA可以用于Real-time PCR、測(cè)序等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
儲(chǔ)存運(yùn)輸：蛋白酶K保存于2~8℃。其余成分可室溫儲(chǔ)存。保存得當(dāng)可穩(wěn)定使用18個(gè)月。
儲(chǔ)存運(yùn)輸：蛋白酶K保存于2~8℃。其余成分可室溫儲(chǔ)存。保存得當(dāng)可穩(wěn)定使用18個(gè)月。
操作步驟：
1.將200μL上述樣本和10μL蛋白酶K加入一只新的1.5mL離心管，然后加入200μL裂解液，震蕩混勻5-10秒。
2.56℃溫育10分鐘。
3.在上述離心管中加入200μL無(wú)水乙醇，充分震蕩混勻5-10秒(此步驟不可離心)。
4.將步驟4混勻的液體吸取至一只套有收集管的吸附柱上（注意不要吸到懸浮的雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），6000-8000rpm離心1分鐘，棄去管內(nèi)液體。
5.將500μL去蛋白漂洗液加入吸附柱中，10000rpm離心30-60秒，棄去管內(nèi)液體。
6.將700μL洗滌液加入吸附柱中，10000rpm離心30-60秒，棄去管內(nèi)液體。
7.將吸附柱放回接液管上，13000rpm離心2分鐘。
8.將吸附柱轉(zhuǎn)移到一只干凈的1.5mL離心管（不提供）中。
9.向吸附柱內(nèi)加50-100μL洗脫液，室溫靜置1分鐘，13000rpm離心1分鐘，棄吸附柱，離心管中液體含有基因組DNA。提純的DNA如果不立刻使用，請(qǐng)保存于-20℃。