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            上海晅科生物科技有限公司>>快速檢測>> 呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)

            呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)

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            • 呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)
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              上海市

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            更新時間:2023/07/05 08:36:53瀏覽次數(shù):3520

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 22份/盒
            貨號 XK-JCH-1207 主要用途 科研
            呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)用于定性檢測有癥狀病人鼻沖洗液或鼻咽拭子標(biāo)本中的呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白抗原的免疫層析試驗。該試驗旨在用于新生兒或5歲以下兒童呼吸道合胞病毒感染的體外診斷。建議陰性結(jié)果做細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)一步證實。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)提供了一種簡便快速檢測鼻洗液和鼻咽拭子標(biāo)本中的 RSV的方法。由于它的簡便快速性,有助于做出治療和住院的決定。

            詳細(xì)介紹

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            產(chǎn)品介紹

            呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)?

            用途

            用于定性檢測有癥狀病人鼻沖洗液或鼻咽拭子標(biāo)本中的呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白抗原的免疫層析試驗。該試驗旨在用于新生兒或5歲以下兒童呼吸道合胞病毒感染的體外診斷。建議陰性結(jié)果做細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)一步證實。

            摘要和解釋

            RSV是上呼吸道和下呼吸道感染的常見原因,也是嬰幼兒患細(xì)支氣管炎和肺炎的主要原因。RSV在每年的秋天、冬天和春天有規(guī)律的發(fā)生,出現(xiàn)感染和暴發(fā)。雖然RSV在較大兒童和成人可引起顯著的呼吸道疾病,但比嬰幼兒緩和的多。為了獲得有效的抗菌治療,RSV的快速鑒定診斷就顯得特別重要??焖勹b定可以減少住院時間,減少抗菌素的使用,減少住院治療費。

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)提供了一種簡便快速檢測鼻洗液和鼻咽拭子標(biāo)本中的 RSV的方法。由于它的簡便快速性,有助于做出治療和住院的決定。

            測試原理

                 呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)是一種用鼻洗液和鼻咽拭子標(biāo)本檢測RSV融合蛋白抗原的免疫層析膜試驗??筊SV抗體,樣本線,吸附到硝酸纖維素膜上,對照抗體作為第二條線吸附到同一膜上??筊SV和對照抗體結(jié)合到可視粒子上,這種粒子干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上。形成的結(jié)合物墊和有條紋的膜結(jié)合形成檢測條。檢測條置于一個硬紙盒的右邊,這個硬紙盒是一個書形的絞鏈的檢測裝置。拭子標(biāo)本(對照和病人的)需要一個預(yù)備步驟,鼻洗液標(biāo)本不需要預(yù)備。執(zhí)行試驗時,測試樣本加到檢測條的頂部的白墊上,閉合檢測裝置。標(biāo)本中的存在的RSV抗原與抗RSV抗體結(jié)合物結(jié)合,形成的抗原結(jié)合物復(fù)合物被固定的抗RSV抗體捕獲,形成樣本線。固定的對照線抗體捕獲一個可視的結(jié)合物,形成一條粉紅色的對照線。對照線在未檢測的裝置中是藍(lán)色的。試驗結(jié)果用可視的檢測的粉紅色到紫色線的存在與否來解釋。陽性結(jié)果,在15分鐘讀數(shù)時,會出現(xiàn)一條樣本線和一條對照線。陰性結(jié)果,在15分鐘讀數(shù)時,只出現(xiàn)一條對照線,表明樣本中未檢測到RSV抗原。對照線未出現(xiàn),或仍為藍(lán)色,表示無論樣本線出現(xiàn)與否,測試無效。

            試劑和材料

            提供的材料

            檢測卡:包被有鼠抗RSV抗原特異抗體和對照線抗體的膜與鼠抗RSV抗體結(jié)合物和對照線抗體結(jié)合物結(jié)合在一個折合式檢測卡上。未檢測的膜在對照線區(qū)域有一條藍(lán)色線。

            移液管:固定體積(100μl)的移液管用于將樣本轉(zhuǎn)移到檢測裝置中。只能用Binax提供或能轉(zhuǎn)移100μl樣本體積的校正管。

            陽性對照拭子:滅活的RSV干燥結(jié)合到拭子上。

            陰性對照拭子;滅活的A群鏈球菌干燥結(jié)合到拭子上。

            對照拭子用的瓶裝洗脫液:盛有一定體積(0.5ml)洗脫液,用于洗脫對照拭子。不要使用其他洗脫液。

            未提供的材料

            時鐘、秒表或跑表;鼻洗液收集容器,鼻咽拭子,運輸媒介。

            可選物品

            鼻咽(NP)拭子標(biāo)本附件包:

            鼻咽拭子:用于呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的無菌泡沫拭子。

            用于拭子標(biāo)本的洗脫液小瓶:

            瓶中盛有一定體積的洗脫液(0.5 ml),用于處理要測試的拭子標(biāo)本。

            注意事項

            1.  體外診斷用。

            2.  使用前要將檢測裝置密封在錫箔中。

            3.  不要使用過期的試劑盒。

            4.  不要將不同批號試劑盒的試劑混合使用。

            5.  檢測條頂部的白色樣本墊盛有從病毒中提取靶抗原的試劑,為了保證Z佳操作,加樣時將標(biāo)本慢慢加到墊的中央,以使所有樣本都吸附到墊上。

            6.  RSV陽性對照拭子是用滅活的RSV感染組織培養(yǎng)細(xì)胞準(zhǔn)備的,隨后用生物測定程序進(jìn)行了測試。測定時要遵守一切注意事項。樣本可能有感染性,應(yīng)當(dāng)根據(jù)地方、州和聯(lián)邦的法規(guī)建立處理和處置措施。

            7.  檢測中加入的試劑不足時會出現(xiàn)無效結(jié)果。為確保加入足夠量的體積,在將吸管中的內(nèi)容物加到樣本墊上時,要確定移液管的下部是充盈的、沒有氣泡產(chǎn)生。如果有空氣存在,通過擠壓上部的吸球,將標(biāo)本排回到容器中,重新吸入標(biāo)本。必要時,換一個新吸管。

            8.  測試鼻洗液標(biāo)本時,吸樣本時要避開粘液部分。如果吸管堵塞,致使下部柄部不充盈,通過擠壓上部的吸球把標(biāo)本排回到容器中,重吸樣本,必要時換一個新吸管。

            9.  聚酯、人造纖維、泡沫和棉花鼻咽拭子都有易彎曲的柄,評估發(fā)現(xiàn)這些都可用于呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)。不要用藻酸鈣鼻咽拭子。

            10.  所有移液管和洗脫瓶都是單次使用的,不要用于多個樣本。

            貯存和穩(wěn)定性

            試劑盒在室溫(59-86℉,15-30℃)保存,呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在失效期前是穩(wěn)定的。失效期標(biāo)注在外包裝和盒內(nèi)。

            標(biāo)本采集和處理

            為了取得Z佳結(jié)果,請使用新鮮鼻咽拭子或鼻洗液標(biāo)本。

            鼻咽拭子:

            聚酯、人造纖維、泡沫和棉花鼻咽拭子都有易彎曲的柄,評估發(fā)現(xiàn)這些都可用于本試劑盒。將收集后的拭子標(biāo)本在1小時內(nèi)加入到0.5~3.0ml的適宜的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中。如果不能立即測定,洗脫液拭子標(biāo)本可在室溫保存4小時,或2-8℃保存48小時。測試前將標(biāo)本平衡至室溫,并輕輕旋動。

            鼻洗液:

            用與病人年齡相稱的操作,在標(biāo)準(zhǔn)采樣杯中收集洗液標(biāo)本。如果不能立即測定,洗液可在室溫保存4小時,或2-8℃保存48小時。測試前將標(biāo)本平衡至室溫,并輕輕旋動。洗液標(biāo)本可在測試前加入到3.0ml的適宜的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中。轉(zhuǎn)移介質(zhì)可導(dǎo)致洗液稀釋,這種稀釋可能像操作部分報道的那樣降低試驗敏感性。

            轉(zhuǎn)移介質(zhì):

            下列轉(zhuǎn)移介質(zhì)受過測試,適用于本試劑盒。

            Amies介質(zhì)

            Binax洗脫液

            Hank,s鹽平衡液

            M4介質(zhì)

            M4RT介質(zhì)

            M5介質(zhì)

            鹽水

            Stuart,s介質(zhì)

            質(zhì)量控制

            日常質(zhì)量控制:

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)內(nèi)嵌有操作對照。作為日常質(zhì)量控制,Binax建議每次試驗都要記錄這些對照結(jié)果。

            操作對照

            A.未檢測裝置在對照位置有一根藍(lán)色線。如果進(jìn)行試驗試劑起作用了,檢測裝置中的這根藍(lán)色線將變?yōu)榉奂t色。

            B. 結(jié)果窗口中清晰的背景顏色是陰性背景對照,15分鐘內(nèi)窗口背景顏色會從粉紅色到白色。背景顏色不應(yīng)干擾測試。

            外部陰陽性對照:

            建議用陰陽性對照確保:

            l  所用試劑有效

            l  試驗操作正確

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)內(nèi)裝有陰陽性對照拭子。這些拭子將監(jiān)控試劑故障。陽性對照確保測定準(zhǔn)確。每打開一個新試劑盒都要測試這些拭子,其他對照遵照下列要求做:

            l  地方、州和/或聯(lián)邦法規(guī)

            l  遵照集團(tuán)和/或本試驗室的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制程序

            為了正確指導(dǎo)質(zhì)量控制操作,請參閱NCCLS EP12A和42CFR493.1202(C)(僅限美國用戶)。

            如果未得到正確的質(zhì)控結(jié)果,請不要報告病人結(jié)果,在工作時間聯(lián)系Binax技術(shù)部(EST)。

            樣本準(zhǔn)備步驟

            鼻洗液:

            鼻洗液樣本不需要預(yù)備,直接進(jìn)入測定程序。

            鼻咽拭子:

            在0.5-3.0ml的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中轉(zhuǎn)動洗脫拭子,進(jìn)入測試程序。注意:如果在Binax洗脫液中洗脫拭子,按照下列程序預(yù)備對照拭子。

            對照拭子:

            1.  試劑盒內(nèi)盛有裝滿洗脫液的小瓶,將瓶蓋開啟。

            2.  將欲測試拭子放入瓶中,將拭子在液體中轉(zhuǎn)動3圈。

            3.  將拭子按在瓶壁上轉(zhuǎn)動,使樣本從拭子中移出。

            4.  扔掉拭子。

            5.  盡早檢測液體樣本,進(jìn)入檢測程序。

            測試程序

            1.  測試前將裝置從錫箔中取出平放在工作臺上。

            2.  將移液頭插入液體樣本中,擠壓上部吸球吸液。當(dāng)吸液頭部注滿液體后松開吸球,這將會把液體吸入移液管中。移液管下部不要產(chǎn)生空氣。

            3.  看檢測裝置上的箭頭找到白色樣本墊,通過擠壓上部吸球,慢慢將移液管中液體全部(100μl)加入到樣本墊的中部。

            4.  立即從檢測裝置中揭去粘附襯,合上并密封裝置,15分鐘時讀窗口中的結(jié)果。早于或晚于15分鐘結(jié)果可能不準(zhǔn)確。

            注意:讀結(jié)果時,如有必要,將裝置傾斜以減少眩光。

            結(jié)果解釋

            對陰性標(biāo)本,窗口底部的藍(lán)色對照線變紫紅色,無其他線出現(xiàn)。

            對陽性標(biāo)本,藍(lán)色對照線變紫紅色,上部的樣本線也變紫紅色。

            如果對照線仍為藍(lán)色或根本沒有出現(xiàn),試驗結(jié)果無效。

            對無效試驗,用一新的檢測裝置重做。如果問題沒有解決,電告Binax技術(shù)部。

            結(jié)果報告

            建議報告結(jié)果

            陽性

            RSV抗原陽性?;畈《敬嬖跁r可能出現(xiàn)陽性結(jié)果。

            陰性

            RSV抗原陰性。由于RSV不能被排除的感染,樣本中的抗原可能在檢出限以下。Binax建議對陰性樣本做培養(yǎng)。

            局限性

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)檢測活的和死的RSV。測試結(jié)果與標(biāo)本中的抗原量有關(guān),可能與用同一標(biāo)本做細(xì)胞培養(yǎng)所得結(jié)果不*。

            標(biāo)本采集量不足或病毒排出水平低可能出現(xiàn)差一點的結(jié)果,甚至可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

            陰性結(jié)果不能排除RSV感染,也不能排除造成呼吸道感染的其他病毒的感染。因此,所得結(jié)果要結(jié)合臨床結(jié)果作出準(zhǔn)確診斷。Binax測試結(jié)果在用palivizumab治療的病人中還沒進(jìn)行評估。

            然而一項分析研究表明palivizumab干擾呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)檢測RSV的能力。

            抗菌素和干擾素的干擾潛力還未確定。

            單克隆抗體可能不能檢測所有抗原變異株或新株RSV。

            預(yù)期值

            RSV的流行年年不同,在秋、冬季暴發(fā)。RSV的陽性檢出率受許多因素影響,包括標(biāo)本采集方法,所用試驗方法,地理位置,特定區(qū)域的流行。2002年Binax臨床研究中,在洗液標(biāo)本中RSV的平均流行是2%,咽拭子標(biāo)本中是4%。2003年收集的鼻咽拭子標(biāo)本中RSV的流行是21%。

            沙丁胺醇檢測試劑盒(酶免)
            安定類檢測試劑盒(酶免)
            恩諾沙星檢測試劑盒(酶免)

            性能數(shù)據(jù)

            分析研究

            分析反應(yīng)性

            已知2個亞群的RSV,每個亞群都保留有呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)作為靶位的融合蛋白2。

            6株A亞群分離菌和5株B亞群分離菌用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)測試為陽性,測試的濃度范圍為1.56×101TCID50/ml到5.00×104TCID/ml。

            注意:已報道的TCID50/ml水平是由一系列因素決定的,包括:使用的細(xì)胞培養(yǎng)系,傳代數(shù)目,各種分離菌的數(shù)目。

            分析特異性(交叉反應(yīng)性)

            為了測定呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的分析特異性,測試了48株可能共棲存在在鼻腔或鼻咽部的病原微生物(28株細(xì)菌,20株病毒)。所有下列微生物在濃度大于1×105TCID50/ml(病毒)或大于1×108/ml(細(xì)菌)時,結(jié)果是陰性的。肺間質(zhì)病毒在2×103TCID50/ml測定沒有交叉反應(yīng)性。

            細(xì)菌

            病毒

            不動桿菌屬

            腺病毒5*

            百日咳鮑特氏菌

            腺病毒7*

            白色假絲酵母菌

            巨細(xì)胞病毒*

            糞腸球菌

            冠狀病毒*

            大腸埃希氏菌

            柯薩奇病毒B4*

            陰道加德納氏菌

            甲型流感   2/日本/305/57

            流感嗜血桿菌

            甲型流感/香港/8/68

            肺炎克雷伯氏菌

            甲型流感/Aichi/68

            格氏乳酸桿菌

            甲型流感/PR/8/34

            嗜肺軍團(tuán)菌

            甲型流感/維多利亞/3/75

            產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌

            甲型流感1/FM/1/47

            卡他莫拉菌屬

            乙型流感 Allen/45

            淋病奈瑟氏菌

            乙型流感 Lee/40

            腦膜炎奈瑟氏菌

            乙型流感 Mass/3/66

            干燥奈瑟氏菌

            乙型流感 Maryland/1/59

            淺黃奈瑟菌

            乙型流感中國臺灣/2/62

            普通變型桿菌

            肺間質(zhì)病毒

             

             

            細(xì)菌

            病毒

            銅綠假單胞菌

            副流感病毒1*

            黏質(zhì)沙雷菌

            副流感病毒2*

            金黃色葡萄球菌

            副流感病毒3*

            金黃色葡萄球菌(產(chǎn)蛋白A株)

             

            表皮葡萄球菌

             

            A群鏈球菌

             

            B群鏈球菌

             

            C群鏈球菌

             

            F群鏈球菌

             

            變異群鏈球菌

             

            肺炎鏈球菌

             

             

             

            這些病毒株是從美國收集獲得的(ATCC),帶有滴度信息,但滴度沒被Binax驗證。

            干擾物質(zhì);

            下列物質(zhì),自然存在于呼吸道標(biāo)本或由人工導(dǎo)入鼻腔或鼻咽部,經(jīng)測評,在下列濃度未發(fā)現(xiàn)對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)造成影響。

             

            物質(zhì)

            濃度

            全血

            2%

            3OTC嗽口液

            25%

            3OTC喉腔滴液

            25%

            3OTC鼻霧化劑

            25%

            4acetamidophenol

            10mg/ml

            乙酰水楊酸

            20mg/ml

            albuterol

            20mg/ml

            撲爾敏

            5mg/ml

            美沙芬

            10mg/ml

            苯海拉明

            5mg/ml

            愈創(chuàng)木酚甘油

            20mg/ml

            oxymetazoline

            10mg/ml

            Phenylephrine

            100mg/ml

            苯丙醇胺

            20mg/ml

            Rebetol eq oac(○,R)R

            500ng/ml

            Relenza eq oac(○,R)R

            20mg/ml

            金剛烷乙胺

            500ng/ml

            Tamiflu eq oac(○,R)R

            100mg/ml

             

            臨床研究

            鼻洗液—臨床特異性(前瞻性研究):

            2002年流感期間,在遍及全美的醫(yī)生辦公室和診所對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)結(jié)果和細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了多中心比較研究。鼻洗液標(biāo)本是從呈現(xiàn)RSV樣癥狀3天左右的兒童或成人采得,并且用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)進(jìn)行了評價。試驗人群女性約占46%,男性約占54%。該研究中的病人不包括從登記之日起6個月內(nèi)接種過流感疫苗的病人,也不包括30日內(nèi)服用過流感或RSV藥物的病人。沒有無效結(jié)果被報道。191份鼻洗液標(biāo)本分4組測試。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)總特異性是98%,總測試*性是98%,95%可信區(qū)間如下所示。

            鼻洗液培養(yǎng)基    

                              +      -

            3

            3

            1

            184

            NOW eq oac(○,R)R   +

            結(jié)果     -

             

            95%CI特異性=98%(184/187)(95.4%  99.4%)總*性=98%(187/191)(94.7%  99.1%)

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在4個測試點相似操作,如下表所示

             

            陽性分?jǐn)?shù)

            特異性

            NOW eq oac(○,R)R/培養(yǎng)

            NOW eq oac(○,R)R/培養(yǎng)

            %

            95%CI

            地點1

            1/1

            91/94

            97

            91.1-98.8

            地點2

            2/3

            83/83

            100

            95.7-100

            地點3

            0/0

            6/6

            100

            59.0-99.6

            地點4

            0/0

            4/4

            100

            47.8-99.5

            鼻洗液—臨床敏感性和特異性(回顧性研究):

            自從在前瞻性研究中少量陽性培養(yǎng)基證實有RSV感染產(chǎn)生以來,進(jìn)行了一次回顧性研究,如下所示。用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)對47份RSV培養(yǎng)陽性標(biāo)本和12份RSV培養(yǎng)陰性標(biāo)本的鼻洗液進(jìn)行了評估。所有標(biāo)本均來自一所大學(xué)醫(yī)學(xué)中心,所有病人都住在美國東北部。試驗人群男性占約49%,女性約占51%。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)敏感性是89%,然而試驗特異性是100%,總試驗*性是92%,95%可信區(qū)間如下所示。

            培養(yǎng)

                           +      -

            42

            0

            5

            12

            NOW eq oac(○,R)R   +

            結(jié)果     -

             

            敏感性=89%(42/47)(77.3%-95.3%)

            特異性=100%(12/12)(75.3%- 99.8%)

            總*性=92%(54/59)(81.6%- 96.2)

            鼻咽拭子敏感性和特異性(前瞻性研究):

            在2002年和2003年流感季節(jié),在美國一家研究中心對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了比較研究。鼻咽拭子標(biāo)本取自有RSV或流感癥狀的兒童。在用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)評價前所有拭子標(biāo)本都放入0.5-3ml的轉(zhuǎn)移介質(zhì)中。試驗人群中女性占43%,男性占57%。測試了179份鼻咽拭子標(biāo)本,全為有效標(biāo)本。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的試驗敏感性、特異性和總*性與培養(yǎng)/FDA比較是93%。95%可信區(qū)間如下所示。

            培養(yǎng)/DFA

                          +      -

            25

            1

            2

            142

            NOW eq oac(○,R)R   +

            結(jié)果     -

             

            敏感性=93%(25/27)(76.5%-97.7%)

            特異性=93%(142/152)(88.3%- 96.4%)

            總*性=93%(167/179)(88.6%- 96.1)

            呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在所有試驗點相似操作,如下表所示。

            地點

            敏感性

            #

            %

            95%CI

            1

            14/15

            93

            69.8-98.4

            2

            9/10

            90

            58.7-97.7

            3

            0/0

            NA

            NA

            4

            2/2

            100

            29.2-99.2

                        

            地點

            特異性

            #

            %

            95%CI

            1

            69/74

            93

            85.1-97.0

            2

            20/23

            87

            67.6-95.3

            3

            16/18

            89

            66.9-96.6

            4

            37/37

            100

            90.7-99.9

             

            重復(fù)性研究:

            在3個獨立的地點將包括陰性、弱陽性、陽性的標(biāo)本編碼分組,利用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)進(jìn)行單盲研究。參與者在3天內(nèi)對每一標(biāo)本進(jìn)行多次測試。234份標(biāo)本100%得到預(yù)期結(jié)果,95%可信區(qū)間為98.4-100%。

            參考文獻(xiàn)

            1)  Williams, KM, Jackon MA, Hamiliton M. Rapid Diagnostic Testing for URIs in Children: Impact on Physician Decision Making and Cost. Infect. Med. 19(3): 109-111, 2002.

            2)  Lopez, Juan A., R. Bustos, C. Orvell, M. Berois, J. Arbiza, B. Garcia-Barreno, J.Melero. Antigenic Structure of Human Respiratory Syncytial Virus Fusion Glycoprotein. Jr. of Virology, vol. 72, no.8, August 1998, pp.6922-6928.

             

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