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            小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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              本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標,本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒

              ?小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括以下內(nèi)容?:

              貨號:BS-9406 小鼠轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-bet)ELISA試劑盒

              一、實驗準備

              ?試劑盒保存與平衡?:試劑盒應保存在2-8℃條件下,使用前需室溫平衡20分鐘?。

              ?實驗器材準備?:準備必要的實驗器材,如酶標儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。

              二、樣本收集與處理

              ?血清?:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘分離血清和紅細胞?。

              ?血漿?:采用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清?。

              ?細胞上清液?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物?1。

              ?組織勻漿?:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。若樣本不及時檢測,應按一次用量分裝并凍存于-20℃?。

              三、實驗步驟

              ?加樣?:

              在酶標包被板上設定標準品孔、待測樣品孔和空白孔。

              標準品設定5個濃度點,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品。

              待測樣品孔先加樣品稀釋液40微升,再加待測樣品10微升(最終稀釋度為5倍)。

              空白孔加入50微升蒸餾水?。

              ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘?。

              ?配液?:將濃縮洗滌液按倍數(shù)稀釋后備用?。

              ?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復5次,拍干?。

              ?加酶?:每孔(除空白孔外)加入酶標試劑50微升?。

              ?再次溫育?:操作同第一次溫育步驟?。

              ?再次洗滌?:操作同洗滌步驟?。

              ?顯色?:每孔先加入顯色劑A50微升,再加入顯色劑B50微升,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘?。

              ?終止?:每孔加終止液50微升,終止反應(顏色由藍轉(zhuǎn)黃)?。

              ?測定?:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下依序測量各孔的吸光度(OD值),測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行?。

              四、注意事項

              試劑盒僅用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷?。

              實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封并低溫干燥保存?。

              嚴格按照說明書操作,避免交叉污染和試劑浪費?3。

              五、實驗室自備器材試劑

              96孔讀板儀器

              自動洗板機

              移液器和槍頭(建議使用多通道移液器/排槍)

              Eppendorf管

              洗板緩沖液(如neutral PBS或TBS,試劑盒內(nèi)提供足量,如需額外緩沖液可參考配方配制)?4請按照說明書嚴格操作,以確保實驗結果的準確性和可靠性。

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