研究發(fā)現(xiàn)Cas12a在靶標(biāo)ssDNA的第22位附近特異切割DNA(稱為cis切割)，并且該切割行為不需要PAM序列的輔助。同時，研究還發(fā)現(xiàn)，一旦Cas12a與crRNA以及靶標(biāo)DNA形成三元復(fù)合體后，該復(fù)合物就會顯示出很強(qiáng)的“亂切"活性，并將體系中任意單鏈DNA切成碎片(稱為trans切割)。借助質(zhì)譜分析，研究人員發(fā)現(xiàn)Cas12a將ssDNA切成2-4nt的片段。根據(jù)一系列點突變的實驗結(jié)果，研究證明了Cas12a的cis和trans切割活性均和其RuvC口袋(‘RuvC pocket’)相關(guān)，并據(jù)此提出了Cas12a切割ssDNA的分子模型。該研究成果有望為DNA臨床診斷提供新的研究思路。

作為生命的基本遺傳物質(zhì)，DNA的精準(zhǔn)編輯和快速檢測一直以來受到高度重視。近年來，隨著CRISPR/Cas9系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)和開發(fā)，人們對基因治療重新燃起了新希望;盡管存在一些潛在的安全風(fēng)險和一定的倫理之爭，CRISPR/Cas9系統(tǒng)出于其相對精準(zhǔn)和高效，已開始被應(yīng)用于臨床的研究。同時，科學(xué)家開始將CRISPR系統(tǒng)引入核酸快速檢測領(lǐng)域，期望為現(xiàn)有的臨床診斷技術(shù)帶來突破。

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Recombinant CRISPR-Cas12a protein

產(chǎn)品說明：

目前為止已發(fā)現(xiàn)6種類型和超過20種的CRISPR-Cas系統(tǒng)亞型。 其中，CRISPR-Cas12a是第二類（V型）用于編輯哺乳動物基因組的CRISPR-Cas系統(tǒng)。Cas12a具有*的功能，可以與CRISPR-Cas9系統(tǒng)進(jìn)行互補。Cas12a ( Cpf1) 蛋白具有類似于Cas9的RuvC內(nèi)切核酸酶結(jié)構(gòu)域。此外，Cpf1不具有HNH內(nèi)切酶結(jié)構(gòu)域，并且Cas12a的N-末端不具有Cas9的α-螺旋識別葉。Cas12a執(zhí)行剪切后的DNA雙鏈斷裂引入了4或5個核苷酸突出的粘性末端，研究表明LbCas12a-crRNA復(fù)合物與互補單鏈DNA或者雙鏈DNA的結(jié)合釋放出強(qiáng)大的非特異性ssDNA反式切割活性。這促使Cas 12a可以作為一種新型的基因檢測和成像的工具。

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產(chǎn)品特點：

Cpf1不需要tracrRNA，只需要crRNA，非常有利于基因組編輯；Cas12a比Cas9小，還具有較小的crRNA分子（接近Cas9的總sgRNA的一半）； Cas12a -crRNA復(fù)合物通過識別富含T的PAM基序來切割靶DNA，與Cas9需要富含G的PAM相反。

產(chǎn)品用途：

可用于基因編輯；新型基因檢測和成像等。

規(guī)格參數(shù)：

貨號：E-002      規(guī)格：100/2000pmol.

質(zhì)量控制：

純      度：經(jīng)高效液相色譜（SEC-HPLC）和SDS-PAGE檢測，純度大于95%.

使用說明：

長期儲存于-80℃，*使用后保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。

本產(chǎn)品僅供研究使用/For Research Use Only.