T4 UvsX重組酶T4 UvsX Recombinase現(xiàn)貨供應(yīng)

T4 UvsX重組酶 T4 UvsX Recombinase是一種來(lái)源于T4噬菌體的重組酶，屬于RecA/Rad51叢的酶，它在RPA反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。T4 UvsX重組酶具有典型的ABC三結(jié)構(gòu)域，分別負(fù)責(zé)ATP結(jié)合，相互作用與DNA結(jié)合。它通過(guò)識(shí)別單鏈DNA上連續(xù)的6-8個(gè)核苷酸堿基，與DNA形成球狀多聚體結(jié)構(gòu)。

T4 UvsX Recombinase由E.coli表達(dá)的重組蛋白，是將蛋白基因接入穩(wěn)定表達(dá)載體，經(jīng)克隆篩選，質(zhì)量驗(yàn)證，挑選的穩(wěn)定表達(dá)株，由化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基（不含有任何動(dòng)物源成分）發(fā)酵制備，工藝穩(wěn)定，保證了產(chǎn)品質(zhì)量及批次間的一致性。

規(guī)格參數(shù)：

貨號(hào)：EH03501

規(guī)格：100ug/1mg/5mg/20mg

為工業(yè)客戶提供g級(jí)。

質(zhì)量控制:

純      度: 經(jīng)高效液相色譜（SEC-HPLC）和SDS-PAGE檢測(cè)，純度大于95%.

T4 UvsX重組酶T4 UvsX Recombinase現(xiàn)貨供應(yīng)

使用說(shuō)明：

長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-80℃，首(空)次使用后保存于-20℃,避免反復(fù)凍融。

工作機(jī)理:

T4 UvsX重組酶 T4 UvsX Recombinase在RPA反應(yīng)中的主要作用是:

(1)穩(wěn)定單鏈DNA

在常溫下，雙鏈DNA初變性為單鏈DNA后，T4 UvsX Recombinase立即識(shí)別并結(jié)合單鏈DNA，形成穩(wěn)定的蛋白-DNA復(fù)合體，防止單鏈DNA再次回環(huán)成雙鏈。

(2)引物退火

在T4 UvsX Recombinase的保護(hù)下，引物與單鏈DNA進(jìn)行退火，與之形成短的雙鏈DNA片段。

(3)替換與釋放

當(dāng)聚合酶識(shí)別引物-模板雙鏈體并開(kāi)始進(jìn)行延伸時(shí)，T4 UvsX Recombinase被替換并釋放，使單鏈DNA完(空)全暴露，供聚合酶延伸。

(4)再循環(huán)

延伸產(chǎn)生的新合成DNA同樣暴露為單鏈，T4 UvsX Recombinase再次識(shí)別并結(jié)合，實(shí)現(xiàn)再循環(huán)，直至擴(kuò)增完成。

T4 UvsX重組酶優(yōu)點(diǎn):

• 可在常溫下高效穩(wěn)定單鏈DNA，這是RPA實(shí)現(xiàn)等溫?cái)U(kuò)增的關(guān)鍵。

• 與DNA的結(jié)合和釋放是反復(fù)可逆的，這使其在RPA反應(yīng)中的再循環(huán)利用成為可能。

• 易于保存和純化，更利于RPA技術(shù)的商業(yè)化開(kāi)發(fā)。

• 目前已有成熟的生產(chǎn)工藝，降低了RPA成本，有利于其廣泛應(yīng)用。

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