純化是大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的常見程序，例如去除 PCR 反應(yīng)中的短引物、未摻入的 dNTP、酶和鹽以及其他雜質(zhì)。純化方法有多種，包括過濾、離心和分離。分離已成為生命科學(xué)中非常流行的方法，并使用各種類型的固相支持物。這包括瓊脂糖珠、瓊脂糖珠、二氧化硅珠和磁珠。使用磁珠分離是所有磁珠分離方法中最快、最干凈且有效的技術(shù)。
磁珠可以涂有針對(duì)抗原、抗體、蛋白質(zhì)或核酸的特異性親和配體。將磁珠與樣品一起孵育后，對(duì)磁珠（和附著的生物分子）施加磁力，以將磁珠收集成濃縮顆粒。分離完成后，可以輕松去除上清液，并且可以從磁珠上洗脫與珠子結(jié)合的生物分子。
使用磁力操縱磁珠的能力使得洗滌步驟比使用瓊脂糖、瓊脂糖凝膠或硅珠更容易和更快。純化的產(chǎn)物還可以使用磁力分離方法以更濃縮的形式回收。
以下是給新用戶的一些提示：
1. 重懸珠子
磁珠需要有足夠的磁性含量，以便可以通過磁鐵簡(jiǎn)單地下拉。傳統(tǒng)磁珠的尺寸超過 1 µm (1 µm = 1000nm)。較新的珠子尺寸更?。ǖ椭翑?shù)百納米），以增加珠子表面積。這導(dǎo)致結(jié)合能力增加并改善分散性。磁珠是由氧化鐵組成的重顆粒，因此它們會(huì)隨著時(shí)間的推移而沉淀。珠子的尺寸越大，沉淀得越快。使用前渦旋并重懸磁珠非常重要，以重新分散磁珠并確保等分試樣之間的一致性。
2. 清洗珠子
增加洗滌步驟的數(shù)量有助于減少與磁珠的非特異性結(jié)合。用乙醇（用于核酸純化）或洗滌緩沖液洗滌磁珠時(shí)，請(qǐng)使用足夠的洗滌溶液覆蓋沉淀。
3. 了解珠子的特性
磁珠有不同的尺寸、形狀、磁響應(yīng)、涂層、緩沖條件和附著的官能團(tuán)。這些變量影響珠子的特性。獲取珠子的基本信息對(duì)于更好地了解如何處理它們非常重要。
4. 捕獲珠子
一般來說，磁珠會(huì)被磁鐵吸引并在一分鐘內(nèi)形成顆粒。延長磁珠對(duì)磁鐵的吸引力，以確保所有磁珠均被回收。
5. 去除洗滌液時(shí)不要擾動(dòng)珠粒
去除洗滌液或上清液時(shí)，傾斜移液器吸頭，使吸頭不接觸磁珠沉淀。這可以防止珠子與上清液重新混合。使用具有傾斜側(cè)面的磁力架，使珠粒集中在管壁的一側(cè)。這使得去除上清液變得更加容易。
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