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StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，產(chǎn)品型號(hào)：FGI-1933。

StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，

概述

提供為：含 0.05% 防腐劑的磷酸鹽緩沖鹽水中的 2 mg/ml 蛋白 A 純化兔 IgG。

是高度純化的人 PARP1 蛋白，在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)。PARP1 具有很高的比活性，大約。20000 U/mg（1U=10 fmol ADP-核糖在 30 分鐘@RT 內(nèi)并入固定化組蛋白）。它在特殊條件下從其天然狀態(tài)凍干，用水重構(gòu)后，它保留了其天然聚 ADP-核糖基化酶活性。SDS-PAGE 的純度 > 95%。每個(gè)小瓶包含 50 µg PARP1（約 1000 單位）。

●用于高通量酶活性/抑制測(cè)定

●目標(biāo)蛋白的聚-ADP-核糖基化

●Western Blot，100 ng/lane，使用 HRP/TMB 比色法

●ELISA，2 ng/孔

●SDS-PAGE, 1 µg/泳道

●作為其他檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)

供應(yīng)形式：凍干固體，50µg/管

優(yōu)點(diǎn)

• 快速確定蛋白質(zhì)在純硝酸纖維素/支持的硝酸纖維素和帶電膜上的轉(zhuǎn)移效率

• 避免因轉(zhuǎn)印不均勻、不轉(zhuǎn)印和氣泡而重新做western blots

• 染色膜可以拍照，用于西方印跡協(xié)議中的質(zhì)量控制步驟。

• 與硝酸纖維素膜和 PVDF 膜兼容

• 防腐劑允許在室溫下保質(zhì)期為 1年

協(xié)議

1.將 10 x 12 cm 膜的大約 10-15 mL 染料倒入干凈的玻璃容器中。

1. 2.通過(guò)在搖擺平臺(tái)上緩慢搖動(dòng) 1-2 分鐘來(lái)孵育膜。

2. 3.去除并丟棄多余的染料，用蒸餾水或 PBS 清洗膜，直到背景清晰。

1. 可能需要多次洗滌以獲得最佳信噪比。

3. 4.膜可以立即拍照，干燥的膜可以用水潤(rùn)濕來(lái)拍照。

4. 5.長(zhǎng)期存放時(shí)條帶可能會(huì)輕微褪色。立即記錄顏色強(qiáng)度可獲得最佳效果

StainODye TM是一種可逆且靈敏的工具，用于檢測(cè)蛋白質(zhì)在硝酸纖維素膜上的轉(zhuǎn)移效率。憑借快速的響應(yīng)時(shí)間、每條帶 25-50 ng 的檢測(cè)下限和快速簡(jiǎn)便的方案，StainODye TM是傳統(tǒng)麗春紅 S 染色的更好替代品。與結(jié)合蛋白質(zhì)的其他染色劑如Amido black / Coomassie不同，StainODye TM對(duì)蛋白質(zhì)具有高親和力，但在 PBS 或封閉溶液中會(huì)被洗掉。  此外，StainODye TM以高親和力標(biāo)記糖基化蛋白 總蛋白質(zhì)的結(jié)果可視化。

定量 Western 印跡應(yīng)用需要將蛋白質(zhì)均勻轉(zhuǎn)移到膜上，以便對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較分析。有一些準(zhǔn)確的方法可以在電泳前將固定數(shù)量的蛋白質(zhì)加載到凝膠上，但是，很少有方法可以量化蛋白質(zhì)在硝酸纖維素/帶電膜上的轉(zhuǎn)移效率。不均勻轉(zhuǎn)移、非轉(zhuǎn)移和氣泡是可能影響定量蛋白質(zhì)印跡結(jié)果的一些問(wèn)題。StainODye TM  _ 允許在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到帶電膜后立即在硝酸纖維素或其他類(lèi)型的轉(zhuǎn)移介質(zhì)上直接觀察蛋白質(zhì)。在StainODye TM中顯影后，蛋白質(zhì)條帶呈紅色或粉紅色。這些染色的膜可以拍照作為記錄。StainODye TM是可逆的，可以通過(guò)用水或 PBS 沖洗印跡來(lái)洗掉。或者，它們可以直接孵育在封閉緩沖液 (BlockOB uffer TM ) 中用于蛋白質(zhì)印跡。StainODye TM帶有防腐劑，在室溫下保質(zhì)期約為 1 年   。

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