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登寧教你正確使用超濾管
閱讀：3526 發(fā)布時(shí)間：2020-1-2超濾管采用離心方式快速處理樣品，是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是，我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過(guò)程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽](méi)有獲得好體驗(yàn)，更重要的是，寶貴的樣本會(huì)遭受本可避免的損失！登寧小編就教你正確使用超濾管。
選對(duì)截留分子量，事半功倍
如果目的蛋白是120kDa，請(qǐng)問(wèn)應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k，50k，還是30k甚至10k？你采用1/2，1/3抑或1/6算法？一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子，即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel再生纖維素膜得率超過(guò)90%。膜孔徑要小于目的分子。因?yàn)闃悠贩肿有螤畈煌?，為了zui大化樣品的回收，對(duì)于沒(méi)有參考的樣品，可以初步選擇截留分子量約為目的分子分子量1/2的膜。
倒轉(zhuǎn)離心，增大回收率
收取體積已經(jīng)很小的濃縮好的樣品時(shí)，超濾管上樣體積有0.5/2/4/15/70mL等，除了采用低吸附的管材和zui低蛋白吸附的再生纖維素超濾膜，其中0.5mL，2mL和70mL的規(guī)格還特別設(shè)計(jì)了反轉(zhuǎn)回收模式，以便使已經(jīng)濃縮的樣品增大回收率。
更多關(guān)于超濾管的正確使用問(wèn)題：
蛋白在濃縮時(shí)出現(xiàn)了沉淀，如何改進(jìn)？
超濾管可以用酒精消毒滅菌么？
懷疑濃縮過(guò)程中目的蛋白和超濾膜之間可能存在非特異性吸附，如何改善？
有時(shí)候用超濾離心管連水都離不下來(lái)，可能是什么原因？
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