使用高效液相色譜 (HPLC) 來分析樣品被廣泛應(yīng)用于藥物組分分析、食品添加劑測定和環(huán)境樣品測試等。由于液相色譜柱是許多實驗室的核心設(shè)備且成本高昂，因此保護(hù)柱子免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護(hù)良好的色譜柱還能產(chǎn)生一致且準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，為可靠的分析結(jié)果提供支持。
如何提高分析色譜柱性能？色譜柱性能取決于多種因素，包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔維護(hù)等。但是在使用過程中，并不是所有實驗條件都是理想條件。例如，某些樣品具有苛刻但必要的 pH 條件。因此，對于液相分析柱的預(yù)防性維護(hù)程序有助于最大限度地延長色譜柱的使用壽命并保持 HPLC 的效率。
哪些因素會影響UPLC色譜柱壽命？常見的 HPLC 問題包括柱背壓升高、泄漏以及無法保持一致的流速等。來自未過濾樣品或流動相的顆粒會導(dǎo)致這些問題出現(xiàn)，任何進(jìn)入 HPLC 系統(tǒng)的物質(zhì)都存在將顆粒物質(zhì)引入色譜柱基質(zhì)的風(fēng)險，從而可能縮短色譜柱的使用壽命。因此，樣品一定要進(jìn)行預(yù)處理，流動相需要用溶劑過濾器進(jìn)行過濾后使用。
對流動相進(jìn)行過濾和脫氣將去除顆粒和溶解氣體，確保它們不會到達(dá)并損壞色譜柱。如果流動相含有來自溶解固體材料的緩沖鹽或改性劑，則過濾尤為重要。在泵的低壓進(jìn)樣口側(cè)使用的恒譜生HPLC溶劑進(jìn)樣口過濾器有助于保護(hù)止回閥、進(jìn)樣器和色譜柱免受有害顆粒污染物的破壞。將此步驟添加到日常工作中有助于降低色譜圖中的基線噪聲。
使用在色譜線過濾器和液相保護(hù)柱也有助于防止顆粒進(jìn)入系統(tǒng)和色譜柱。色譜柱是 HPLC 系統(tǒng)中的關(guān)鍵組件，這些色譜柱保護(hù)器的使用取決于應(yīng)用，需要一種或兩種。恒譜生色譜保護(hù)柱是一種短柱，樣品和流動相在進(jìn)入主柱之前通過它，有助于去除雜質(zhì)和懸浮固體，防止它們到達(dá)分析柱。分析保護(hù)柱的使用取決于具體的應(yīng)用，當(dāng)色譜行為發(fā)生變化時，例如背壓、保留時間變化或峰展寬時，需要定期更換保護(hù)柱。
實驗中也需要考慮樣品與流動相的兼容性，因為某些樣品成分會與特定的 HPLC 溶劑發(fā)生反應(yīng)。例如，醛和酮與氨基流動相反應(yīng)。避免反應(yīng)性組合有助于保護(hù)色譜柱免受損壞。
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