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            透射電鏡觀察細胞樣品實驗檢測服務(wù)

            閱讀:1181          發(fā)布時間:2021-11-16

            一、 透射電鏡觀察細胞樣品實驗檢測服務(wù)實驗儀器與試劑

            表格一:實驗儀器

            儀器

            透射電子顯微鏡

            超薄切片機

             

            表格二:試劑

            試劑

            PBSpH7.4

            無水乙醇

            丙酮

            1%鋨酸

            Pon812包埋套裝

            酸雙氧鈾

            醋酸鉛

             

            二、 實驗步驟

            1.  醛類固定:加入1mL 2.5%戊二醛溶液(PBS 稀釋),4度固定過夜;

            2.清洗:用PBS清洗4次,每次靜置15min

            3.鋨酸固定:用1%鋨酸溶液 4度固定2h;

            4.清洗:用PBS清洗4次,每次靜置15 min;

            5.脫水:用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脫水各靜置15min(70%乙醇中靜置過夜),再用100%乙醇脫水2次,每次靜置20min

            6.置換:用丙酮置換2次,每次靜置15min;

            7.  浸漬:過程如下:

            A.丙酮:包埋劑=21(體積比)的浸漬液中浸漬1h

            B.丙酮:包埋劑=12(體積比)的浸漬液中浸漬4h;

            C.純包埋劑浸漬2, 每次24h

            8. 包埋:將樣品放入盛有純包埋劑的包埋板中;

            10.聚合:將包埋板置于65℃條件下各聚合48h以上;
            11.修塊:將包埋頭修成梯形,且樣品表面積小于0.2mm×0.2mm

            12.超薄切片:切片厚度70nm;

            13.染色:醋酸雙氧鈾染色 10min后清洗;

                      醋酸鉛染色 10min后清洗;

            14. 上機檢測。

             


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