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廣譜型DNA免核酸提取試劑介紹-M-DNA01
閱讀：842 發(fā)布時間：2021-12-23品牌：Labchant
產(chǎn)品貨號：M-DNA01
產(chǎn)品名稱：廣譜型DNA免核酸提取試劑
產(chǎn)品規(guī)格：1ml 50T
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒中采用*配方，能夠快速的裂解各種常見樣本，無需反復(fù)離心，通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無需進(jìn)行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、Lamp等擴(kuò)增。
DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、細(xì)胞、組織（例如淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、扁桃體、肺、肌肉等）、拭子（例如血拭子、咽拭子）、鼠尾、病毒、革蘭氏陽性菌、大腸桿菌、葡萄球菌以及環(huán)境樣本（例如擦拭物、水樣本、鞋底）等樣品中基因組DNA的提取。
本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等域。
試劑盒組成
組分 | M-DNA01 |
DNA-Lysis | 1 mL |
保存條件
4oC保存。使用將DNA-Lysis室溫充分混勻（若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正常現(xiàn)象）。
需要準(zhǔn)備
金屬恒溫浴、離心機(jī)
使用方法
一、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
（1）組織液包括組織研磨液、傳代細(xì)胞懸液、血清、唾液、尿液等。取20 μL組織液置于離心管中。
（2）取10 μL（1）中組織液，加入20 μL DNA-Lysis。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘。
（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。
注意：組織液為血液樣品時，提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時，需要將提取物按照1：40稀釋。例如5μL 提取物加入195μL中。
2. 組織塊的處理
（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。
（2）用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊（< 3 mm3），并將組織塊剪成肉泥狀，放在（1）中溶液中。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘。
（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。
3. 菌類的處理
（1）取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。
（2）用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分，放在（1）中溶液中。如果是培養(yǎng)液，取20μL放在（1）中溶液中。
（3）混勻。
（4）置于55oC加熱5分鐘。
（5）12000rpm離心2-3分鐘，取上清。
二、在DNase free 的離心管中配制PCR反應(yīng)體系
20 μL體系（推薦） | |
2×TaqMix(With Dye) | 10 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL |
Template DNA | 3 μL |
ddH2O | 5 μL |
注意事項
（1）在進(jìn)行大量樣品檢測時，可將本試劑盒的試劑預(yù)分裝到8聯(lián)PCR管，用多通道移液器進(jìn)行多樣本的處理。
（2）取樣的細(xì)胞量應(yīng)當(dāng)適中，濃度不宜過高或過低，處理后溶液應(yīng)當(dāng)以透明為宜。擴(kuò)增細(xì)胞DNA時，取2000個細(xì)胞以內(nèi)即可；擴(kuò)增病毒基因時需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細(xì)胞數(shù)量。
（3）樣品處理過程中應(yīng)當(dāng)防止交叉污染，推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程，以檢測環(huán)境的污染。
（4）PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預(yù)測Tm值減去5℃，或者通過梯度PCR摸索*佳退火溫度。
（5）用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月。
（6）為防止試劑盒污染，請勿將不同批號試劑盒混用。
原創(chuàng)作者：上海創(chuàng)凌生物科技有限公司