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            技術(shù)文章

            zeta life 轉(zhuǎn)染試劑AD600025可轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞

            閱讀:761          發(fā)布時(shí)間:2022-2-11

            簡(jiǎn)要描述:

            RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開(kāi)發(fā)的試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中。

            RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑

            簡(jiǎn)要描述:

            RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開(kāi)發(fā)的試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中。

            產(chǎn)品介紹

            RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑介紹:

            進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉(zhuǎn)染試劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性,不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡,不激活細(xì)胞免疫機(jī)制。其特點(diǎn)是非脂質(zhì)體材料,大小是80nm左右,由于形狀是圓形的,不會(huì)對(duì)細(xì)胞有物理性損傷,材料表面有特異性結(jié)合接頭,只特異性識(shí)別DNA、RNA,對(duì)血清成分(如細(xì)胞因子、蛋白、內(nèi)毒素等)不識(shí)別也不結(jié)合;特異性接頭與核酸形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物,轉(zhuǎn)染復(fù)合物通過(guò)細(xì)胞主動(dòng)吞噬進(jìn)入細(xì)胞,進(jìn)入細(xì)胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料,對(duì)細(xì)胞無(wú)內(nèi)毒素影響,不易出現(xiàn)細(xì)胞死亡。

            一、產(chǎn)品說(shuō)明:

            1、產(chǎn)品名稱(chēng)

            Advanced DNA RNA Transfection Reagent

            2、包裝規(guī)格

            貨號(hào):AD600150

            規(guī)格:1.5ml

            3、儲(chǔ)存條件

            常溫運(yùn)輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。

            二、操作步驟

            提 1 天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在 60-80%左右,再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

            核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。

            在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

            細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程中不用換液。

            分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時(shí)后熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。若 進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時(shí)熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。

            三、RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果圖和轉(zhuǎn)染條件分享

            轉(zhuǎn)染細(xì)胞:RAW264.7細(xì)胞;

            培養(yǎng)板:12孔板;

            轉(zhuǎn)染時(shí)間:48小時(shí);

            轉(zhuǎn)染細(xì)胞起始數(shù)量: 電訊;

            轉(zhuǎn)染試劑用量:電訊;

            轉(zhuǎn)染試劑:Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑;

            培養(yǎng)細(xì)胞使用血清:Zeta Life,Z7180FBS-500超低內(nèi)毒胎牛血清



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