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蛋白質(zhì)印跡（WB）實驗的意義和步驟介紹
閱讀：1311 發(fā)布時間：2022-8-8免疫印跡（WB）
免疫印跡是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。
實驗意義
WB用于鑒定能夠被特異性抗體識別的大分子抗原（通常是蛋白質(zhì)），并測定抗原的分子量。
實驗步驟
1.蛋白樣品制備
2.電泳分離
3.電轉(zhuǎn)移
4.免疫印跡顯色：ECL顯色系統(tǒng)
結(jié)果展示
實驗完成周期及交付標準
1. 實驗周期：2-3周
2. 交付標準：黑白顯色圖、內(nèi)參、灰度值分析、柱狀圖、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）
需確認的信息
1. 樣本種屬及類型，是組織還是細胞？
2. 需要檢測目標蛋白。
3. 檢測分樣本數(shù)及分組，每張膜的上樣順序？
4. 是否購買一抗，本公司可代購。