您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
溶血性鏈球菌實時熒光檢測系統(tǒng)
溶血性鏈球菌實時熒光檢測系統(tǒng)
Real-time fluorescence detection system for hemolytic streptococcus
2.1產(chǎn)品簡介
溶血性鏈球菌實時熒光檢測系統(tǒng)是指通過熒光染料或熒光標記的 特異性探針,對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時監(jiān)測反應過程的儀 器。結合相應的軟件可以對產(chǎn)物進行定性和定量分析，計算待測 樣品模板的初始濃度。在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒 光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程。后通過標準曲線對未知模 板進行定量分析,包括TaqMan熒光探針和SYBR熒光染料。PCR 能對特定基因或物種的豐度進行相對定量，比較不同處理或樣品間 的差異，如基因拷貝數(shù)、表達量來硏究基因表達對處理的響應， 同時可以獲得PCR擴增效率等信息.
產(chǎn)品功能
溶血性鏈球菌實時熒光檢測系統(tǒng)是特異性靶基因檢測與定量的一體化平 臺。快速型實時定量PCR儀將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應用分 析軟件結合在一起,可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴 增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果, 無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進行任何實驗操作。
2.2試劑介紹
技術特點：
◆準確可靠，臨床雙盲對照試驗>1000例，結果與金標準測序法比對，結果*性大于99%。
◆高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
◆快速：整個檢測流程只需3小時。
◆產(chǎn)品僅用于科研簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。
◆防污染
◆高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需* 配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點：
◆ 即開即用，用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
◆ 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
◆ 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
◆ 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
◆ 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
◆ 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
◆ 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
◆ 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭，下同)。
◆ 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
◆ 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
◆ 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
◆ 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
◆ 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC(樣品制備陽性對照)，一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
◆ 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系，在樣品制備室進行)
◆ 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
產(chǎn)品主要參數(shù)
主要特點：
可檢測固態(tài)、液態(tài)、表面、膏狀、漿狀樣本;
樣本在檢測時無需任何的前處理過程，直接丟入檢測瓶即可;
可自動控制孵育溫度和孵育時間
檢測樣本只需1ml/1g;同一溫度下可同時檢測8個樣品;
靈敏度高達可檢測到1目標微生物;特異性高達99.999%;
獨立、持續(xù)的檢測并記錄瓶中的微生物數(shù)量(CFU)
簡單三個操作步驟，傻瓜型，無需專業(yè)操作人員;
儀器便攜式，可隨時隨地進行檢測、100%定量分析，并可直接連接電腦出定量分析檢測報告。
RVL微生物檢測瓶
檢測范圍：
活細菌總數(shù)
大腸菌群/大腸桿菌/大腸桿菌O157, O111, O104...等
腸道桿菌科
金黃色葡萄球菌
銅綠假單胞菌;綠膿桿菌
沙門氏菌
李斯特菌
腸球菌
酵母菌
應用范圍：
衛(wèi)生控制：
-食品(HACCP)
-廚房、工具、表面(HACCP)
-水質(zhì)
-(CDC)疾病控制、進出口檢驗檢疫
-藥品及 化妝品
與我們的生活息息相關，例如：
咖啡館、餐廳
水源檢測、制水廠
分析實驗室和HACCP診斷
農(nóng)產(chǎn)品及相關加工公司
藥廠、藥房、化妝品廠
環(huán)境監(jiān)測機構
水配送公司
消費者保護團體、工商管理機構
室內(nèi)空調(diào)調(diào)節(jié)公司
集傳統(tǒng)檢驗方法優(yōu)點于一身:
-培養(yǎng)皿法
-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析)
-免疫法(抗原搜尋)
-基因法(基因搜尋)
檢驗樣本無需任何前處理
-液態(tài)樣本，固態(tài)樣本和表面樣本均無需前處理
定性和定量分析
-搭配檢測機：100%的定量分析
-肉眼判讀：定性或半定量分析
簡單便捷
-簡單的三個步驟得到檢測結果
檢驗迅速
-是傳統(tǒng)檢驗方法速度的2～5倍
高靈敏性
-可以檢測到1目標微生物(理論極值)
高特異性
-特異性高達99.999%(理論極值)
檢測瓶就是實驗室
-微生物檢測瓶隨時可用
-未受過嚴格專業(yè)訓練的檢測人員也可隨時隨地進行檢測
使用后安全丟棄
-和過期藥物同樣處理
微生物檢測瓶尤其能應用于軍事、大型展會等等的食品快速檢測
(微生物快速檢測)
RVL微生物快速檢測瓶
微生物快速檢測儀RVLM :
-簡單、便捷，100%定量分析
-在同一溫度下可容納8個樣品。
-可自動控制孵育溫度和孵育時間
-獨立、持續(xù)的檢測并記錄瓶中的微生物數(shù)量(CFU)
使用后無菌處理
-按下RVL微生物檢測瓶的瓶蓋上方
-放心安全丟棄(與過期藥物同樣處理)
若沒有RVLM微生物檢測儀：
-充分溶解混合后，放入恒溫器孵育
(在適當溫度下孵育適當時間，請查上表)
-肉眼判讀定性或半定量分析結果
以大腸菌群為例：
若菌落數(shù)>108CFU/ml：2小時內(nèi)顏色即變成黃色;
若菌落數(shù)<102CFU/ml：14小時內(nèi)顏色不會變成黃色;
若菌落不存在：18小時后顏色仍保持開始顏色
或其他中間色(不變成黃色)
簡單三個步驟得到100%定量檢測結果：
一步：放入樣本
-打開瓶蓋，加入11ml無菌水
-放入液態(tài)(固態(tài)/表面)樣本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)
-蓋緊瓶蓋
第二步：搖動瓶子直到溶劑充分溶解或混合
(充分溶解或混合如右圖所示)
-若使用振蕩器，需時20秒左右;
或用手用力搖，需時2~3分鐘左右。
第三步：在適當時間判讀結果(請查左表)
-使用RVLM微生物檢測儀：
-充分溶解混合后立即放入檢測儀
-得到100%定量分析結果