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非洲豬瘟檢測(cè)儀在使用中要注意的幾點(diǎn)，競(jìng)道JD-PCR非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)常在單核巨噬細(xì)胞及網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中復(fù)制,是非洲豬瘟相關(guān)病毒科的成員。ASFV屬單分子線(xiàn)狀雙鏈DNA病毒,此病毒基因組較大,在170~192kb之間,其基因組包括一個(gè)保守中心和兩端可變區(qū),這些可變區(qū)可編碼5種多基因家族,這與病毒基因組的可變性相關(guān)[1]。根據(jù)p72(B646L)基因末端約500bp核苷酸的差異,已鑒定出24種AS-FV基因型[2],但僅有一個(gè)血清型,血清型根據(jù)血細(xì)胞吸附特性又分為8個(gè)血清群[3]。ASFV引起非洲豬瘟(African swine fever,ASF),常以高病死率、高熱、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血為主要特征[1]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(Office International des Epizooties,OIE)將ASF列為法定上報(bào)疫病,我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。ASFV急性和急性型病死率可高達(dá)100%,而在其自然宿主如疣豬(Phacochoerus aethiopicus)、叢林豬(P. porcus)中引起不明顯的持續(xù)性感染[1]。ASFV感染導(dǎo)致的病理學(xué)變化包括皮下出血、脾臟腫大、淋巴結(jié)出血、胃腸粘膜及呼吸系統(tǒng)彌散性出血等,與豬瘟(Classical swine fever,CSF)、豬皮炎腎病綜合癥(Porcine dermatitis nephropathy syn-drome,PDNS)[4]、細(xì)菌感染引起的敗血癥尤為相似。因此,通過(guò)尸體解剖檢查很難區(qū)分,需依靠實(shí)驗(yàn)室診斷進(jìn)行鑒別。自2018年8月中國(guó)沈陽(yáng)確診起非洲豬瘟以來(lái),截止到2019年1月14日,我國(guó)已有24個(gè)省份發(fā)生80余起疫情,ASF對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在2018年有俄羅斯、羅馬尼亞、波蘭、烏克蘭、匈牙利、保加利亞、比利時(shí)、南非、贊比亞等22個(gè)國(guó)家發(fā)生疫情,可見(jiàn)ASF疫情對(duì)所有養(yǎng)豬業(yè)國(guó)家都是一種重大的經(jīng)濟(jì)威脅。由于目前尚無(wú)有效的ASF疫苗和治療方法,為了阻止疫情在國(guó)內(nèi)蔓延或是波及鄰國(guó)養(yǎng)豬業(yè)安全,疾病的控制主要依靠撲殺感染動(dòng)物、嚴(yán)格的衛(wèi)生措施和快速的診斷技術(shù)。筆者將ASF的診斷技術(shù)歸納為兩類(lèi):類(lèi)是病原學(xué)檢測(cè);第二類(lèi)是血清學(xué)檢測(cè)。本文總結(jié)了OIE推薦的ASFV檢測(cè)技術(shù)以及現(xiàn)場(chǎng)使用高效、快速、的檢測(cè)方法,旨在為現(xiàn)場(chǎng)診斷提供理論基礎(chǔ),快速排查本病,為后續(xù)進(jìn)一步采取措施爭(zhēng)奪更多寶貴時(shí)間。

一、儀器用途競(jìng)道JD-PCR非洲豬瘟檢測(cè)儀

非洲豬瘟病毒檢測(cè)是非洲豬瘟防控工作的重要舉措，意義重大。為進(jìn)一步提高非洲豬瘟病毒檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，規(guī)范非洲豬瘟病毒診斷制品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)和使用行為，2021年1月1日起，各有關(guān)門(mén)和單位在動(dòng)物檢疫或疫病監(jiān)測(cè)、診斷中，對(duì)生豬及其產(chǎn)品開(kāi)展非洲豬瘟病毒檢測(cè)，應(yīng)當(dāng)使用已取得農(nóng)業(yè)農(nóng)村核發(fā)的產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(hào)的非洲豬瘟病毒診斷制品，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

競(jìng)道非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀(實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀支持變溫檢測(cè))用于運(yùn)行病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析;儀器既可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作，又可用于野外科學(xué)實(shí)驗(yàn)，配合相應(yīng)試劑，對(duì)取自待檢測(cè)樣本的分析物或其他分析物中的目標(biāo)核酸進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的定性檢測(cè)。

競(jìng)道非洲豬瘟檢測(cè)儀配套非洲豬瘟病毒熒光pcr檢測(cè)試劑盒、非洲豬瘟病毒熒光pcr核酸檢測(cè)試劑盒均已經(jīng)獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)品批準(zhǔn)，可以滿(mǎn)足非洲豬瘟核酸現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)需求?？啥靠焖傩竽令?lèi)疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病，廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、食品加工廠(chǎng)、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、農(nóng)業(yè)農(nóng)村、畜牧、檢驗(yàn)檢疫單位使用。

實(shí)驗(yàn)員需要經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和儀器、軟件操作的專(zhuān)門(mén)培訓(xùn)，具備熟練的相關(guān)操作技能。

二、儀器特點(diǎn)

1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿(mǎn)足外出實(shí)驗(yàn)的需求。

2.內(nèi)置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡(jiǎn)便快捷。

3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片，結(jié)合德國(guó)PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補(bǔ)償邊緣的溫度控制模式，大升溫速度7℃，大降溫速度5℃，大大縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

4.整板3s快速采光模式，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果孔位一致性。

5.簡(jiǎn)潔直觀(guān)的軟件引導(dǎo)，輕松開(kāi)啟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

三、非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀應(yīng)用領(lǐng)域

□ 基礎(chǔ)科學(xué)研究

□ 病原體檢測(cè)

□ 肉制品摻假

□ 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)

□ 食品安全檢測(cè)

□ 藥物開(kāi)發(fā)及合理用藥

□ 基因表達(dá)

□ 水體監(jiān)測(cè)

四、技術(shù)參數(shù)

樣品容量：16x0.2ml、支持8聯(lián)管

適用耗材：常見(jiàn)透明PCR 耗材，8x0.2ml 排管，0.2ml 單管

反應(yīng)體系：5-120ul反應(yīng)模式體系

加熱/制冷模塊：進(jìn)口半導(dǎo)體熱電模塊

溫度控制范圍：4°C-99℃

升降溫平均速率≥2°C/秒

溫控精度：≤±0.1°C

溫度均勻性：≤± 0.2°C

溫控區(qū)域數(shù)量：多點(diǎn)(2 點(diǎn))

梯度數(shù)：0 個(gè)

梯度溫度范圍：無(wú)

梯度孔數(shù)：無(wú)

激發(fā)光源：免維護(hù)led

激發(fā)光波長(zhǎng)范圍：400-700nm

檢測(cè)件：進(jìn)口光電檢測(cè)器

檢測(cè)通道數(shù)：標(biāo)配 1通道(FAM)、高配(選配)(FAM、VIC)

適用染料和探針：FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3(選配), ROX/Texas Red(選配), Cy5,TAMARA(選配)

軟件功能：熒光定量 PCR 系統(tǒng)軟件;