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MLCB寒天培地培養(yǎng)基的試驗 原理、試驗方法及結(jié)果
閱讀：593 發(fā)布時間：2024-5-30一、試驗原理：
本產(chǎn)品用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)。
酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生長所需的碳源和氮源；氯化鈉用于維持均衡的滲透壓，甘露醇作為可發(fā)酵的糖類被沙門氏菌利用產(chǎn)酸；沙門氏菌產(chǎn)生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應(yīng)生成堿性物質(zhì)；在堿性條件下，硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)使得菌落的顏色呈現(xiàn)黑色；煌綠和結(jié)晶紫可抑制大腸桿菌等革蘭氏陽性菌的生長；瓊脂起凝固的作用。
二、培養(yǎng)基配方（g/L）：
表1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基配方
成分 | 添加量 |
酵母浸粉 | 5.0 |
蛋白胨 | 10.0 |
牛心浸粉 | 2.0 |
氯化鈉 | 4.0 |
甘露醇 | 3.0 |
L-賴氨酸鹽酸鹽 | 5.0 |
硫代硫酸鈉 | 4.0 |
檸檬酸鐵銨 | 1.0 |
煌綠 | 0.0125 |
結(jié)晶紫 | 0.01 |
瓊脂 | 15.0 |
pH值6.8±0.2 | 25℃ |
三、試驗方法：
1.稱取本品49.0g，加熱煮沸溶解于1000mL蒸餾水（可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量）中，冷至50-55℃時,傾入無菌平皿，備用；
2.質(zhì)控菌液按國標(biāo)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成；
3.用接種環(huán)取一環(huán)相應(yīng)菌液劃線接種于無菌培養(yǎng)基上，36±1℃需氧培養(yǎng)18-24h。
四、試驗結(jié)果判斷：
1.外觀
此干燥培養(yǎng)基粉末均勻，呈淡黃色，煮沸滅菌后制備好的培養(yǎng)基為藍(lán)紫色透明固態(tài)。
2.生物學(xué)實驗
接種以下質(zhì)控菌株，放入培養(yǎng)箱中，于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24 h，觀察試驗結(jié)果。
表2 MLCB寒天培地培養(yǎng)基不同菌株質(zhì)量控制結(jié)果
質(zhì)控菌株 | 菌株編號 | 接種量（CFU） | 質(zhì)控情況 | 菌落特征 |
腸炎沙門氏菌 | CMCC(B) 50746 | / | ＋＋＋ | 黑色中心菌落 |
鼠傷寒沙門氏菌 | ATCC 14028 | / | ＋＋＋ | 黑色中心菌落 |
大腸埃希氏菌 | ATCC 25922 | / | - | 抑制 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC 25923 | / | - | 抑制 |
圖1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。