大鼠胚胎干細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環(huán)境，ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說，胚胎干細胞（ES細胞）是一種高度未分化細胞。它具有發(fā)育的全能性，能分化出成體動物的所有組織和器官，包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)結構，細胞核大，有一個或幾個核仁，胞核中多為常染色質，胞質胞漿少，結構簡單。體外培養(yǎng)時，細胞排列緊密，呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色，ES細胞呈棕紅色，而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限，形成的克隆細胞彼此界限不清，細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別，有其特定的生長特性和特定的標志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標志，這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定，除此之外，胚胎干細胞還可以在體外傳代，并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層（MEF）上培養(yǎng)時，胚胎干細胞都能呈克隆性增殖，長期保持核型正常和穩(wěn)定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細胞衰老密切相關，多數(shù)成熟細胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點，也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)，消化傳代純化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胚胎干經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 短梭形、多角形

傳代特性 可傳5-8代左右

消化液 0.025%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

公司正在出售的產品：

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：   Fibronectin   規(guī)格：      英文縮寫：   FN

FMS樣酪酸激酶   英文名稱：   Fms-related tyrosine kinase-3   規(guī)格：      英文縮寫：   Flt3

小鼠Flt3配體   英文名稱：   Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   Flt3 Ligand

小鼠纖維連接蛋白   英文名稱：    fibronecti   規(guī)格：      英文縮寫：   FN

小鼠胃泌酸調節(jié)素(OXM)試劑盒 96T/48T

Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)試劑盒

Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerleukin1,IL-1試劑盒雞白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞ERK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

PE標記人CD18單克隆抗體

酪激酶A/B/C重組兔單克隆抗體

PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

轉鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

PRLR Protein Rat 重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

CCL1重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein

大鼠胚胎干細胞兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒

People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒E

Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humandynorphin,Dyn試劑盒人強啡肽(Dyn)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織P38a激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。