詳細(xì)介紹
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
紫云英根瘤菌培養(yǎng)溫度: 35-37℃英文名稱:Rhizobium培養(yǎng)保藏法:培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。公司專業(yè)代理ATCC菌種,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
Rhizobium | YSJ6998 |
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
下列是公司正在*的產(chǎn)品:
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)左沙胺醇鹽鹽相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品
改良V-P培養(yǎng)基左沙胺醇鹽鹽相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)(TSSB)左沙胺醇鹽鹽相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品
酪蛋白瓊脂沙胺醇相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品
產(chǎn)芽孢肉湯鹽左旋咪唑標(biāo)準(zhǔn)品
乳桿菌瓊脂培養(yǎng)基左乙拉西坦標(biāo)準(zhǔn)品
乳桿菌肉湯培養(yǎng)基左乙拉西坦外消旋混合物標(biāo)準(zhǔn)品
維生素B12測(cè)定用培養(yǎng)基左乙拉西坦相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
煙測(cè)定用培養(yǎng)基左乙拉西坦相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
葉測(cè)定培養(yǎng)基鹽左旋布諾洛爾標(biāo)準(zhǔn)品
泛測(cè)定培養(yǎng)基鹽左卡巴斯汀標(biāo)準(zhǔn)品
游離生物素測(cè)定培養(yǎng)基左卡巴斯汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
肌醇測(cè)定培養(yǎng)基左卡尼汀標(biāo)準(zhǔn)品
多價(jià)蛋白胨酵母膏(PY)培養(yǎng)基左卡尼汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
營(yíng)養(yǎng)肉湯(不含糖)左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)品
紫云英根瘤菌價(jià)格CHO-K1中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞KIRREL2 Antibody (monoclonal) (M01)
TCMK-1小鼠正常腎細(xì)胞KLHL12 Antibody
Clone 9大鼠肝細(xì)胞KLHDC4 Antibody (monoclonal) (M02)
MS-5小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞KNTC1 Antibody (monoclonal) (M01)
ROS1728 大鼠成骨細(xì)胞KLHL25 Antibody (monoclonal) (M09)
RBMVEC 大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞KLHL21 Antibody
Kupffer肝枯否細(xì)胞Lamin A Antibody
MLg小鼠肺成纖維細(xì)胞Lamin A/C Antibody
SVEC4-10小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞LMNA / Lamin A/C Antibody (aa464-572, clone JOL2)
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏