詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品名稱 | 5-LO/LOX elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human 5-lipoxygenase, 5-LO/LOX Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
遠志口山;遠志山III質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品PolygalaxanthoneIII黃芪黃費氏中華根瘤菌Sinorhizobiumfredii
三七皂苷Ft1Threeseven saponinFt1保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支跨膜接頭蛋白SIT抗體
磺惡唑β-D-葡萄糖苷質(zhì)量規(guī)格:國進口Sulfamethoxazoleβ-D-Glucuronide人前列腺細胞22RV1
訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/vial6號染色體開放閱讀框146抗體pANCAELISAKit人抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA試盒
冬凌草素規(guī)格:HPLC≥98%;10mg訂購|咨詢?nèi)藀olo樣蛋白激酶1(PLK1)ELISA試盒人96T7.8-500pg/mL大鼠白介素5(IL-5)ELISA試盒,英文名:IL-5ELISAKit
阿扎那韋-標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格:國進口Atazanavir-Labeledd4FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
蜂房Hive保存:-20℃規(guī)格:0.5g還原型輔酶Ⅱ化酶5/煙酰腺嘌呤二核苷抗體
石蒜;Lycorine訂購|咨詢規(guī)格:20mg20號染色體開放閱讀框19抗體FcγRⅠELISAKitIgG-Fc片段受體Ⅰ(FcγRⅠ)ELISA試盒
C10E6,10%溶液質(zhì)量規(guī)格:BRC10E6視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)重組蛋白RecombinantRetinolBindingProtein4,Plasma(RBP4)
厚樸酚HouPufen保存:-20℃規(guī)格:20mg多型性腺瘤基因1蛋白抗體
鹽尼卡平質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRNicardipinehydrochloride仔副菌培養(yǎng)基1萬毫升/袋國產(chǎn)/進口
右旋糖苷/葡聚糖10質(zhì)量規(guī)格:M.W:10000Dextran-10QGY-7703(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
己酰(>98.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)Hex*單核細胞增生李氏桿菌Listeriamonocytogenes
熒光桃紅B,性紅92質(zhì)量規(guī)格:ARPhloxineB人表皮角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基鼠李糖桿菌Lactobacillusrhamnosus
5-LO/LOX elisa試劑盒TSARG2RLBP1L1上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
Transportin 1RBBP6化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
THAP1RRBP1化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
TIA1RPL5化表皮生長因子受體抗體
CDC20BANKRD40兔多肽YY(PYY)免疫試盒
Cell division control protein septin D1API5兔對酶-1(PON1)免疫試盒
ccnb1ip1AQP3兔膽酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)免疫試盒
Cdc14AAPOD兔超化物歧化酶1,可溶(SOD1)免疫試盒
C7orf12ACSM3兔超化物歧化酶[Mn],線粒體(SOD2)免疫試盒
CA XIARTS1兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。