詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品名稱 | TACE elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human TNF α converting enzyme, TACE Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
(1RS)-1-(6--2-萘基)醇(萘普生雜質(zhì)K)質(zhì)量規(guī)格:國進口(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol(NaproxenImpurityK)小鼠脈絡膜血管細胞*培養(yǎng)基100mL
氨;D-Alanine訂購|咨詢規(guī)格:100mg肝臟X受體抗體ARKELISAKitArkadia蛋白(ARK)ELISA試盒
土茯苓SoilFuling保存:-20℃規(guī)格:1g核孔蛋白1抗體
細葉遠志皂苷;細葉遠志皂甙Tenuifolin; tenuifolin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支非受體酪氨蛋白激酶2抗體
9-菲(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)9-Bromophenanthrene釀酒酵母SaccharomycescerevisiaeBSC-1(猴腎細胞)
無水銅(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCopper(II)sulfate,anhydrousWS瓊脂/WuhanSalmonellaAgar分離沙門氏菌和志賀氏菌用250克國產(chǎn)/進口
四;純品型;標準品;有證書訂購|咨詢規(guī)格:0.1g鳥嘌呤核苷交換因子GEFT抗體PUS10ELISAKit假尿苷合酶10(PUS10)ELISA試盒
絞股藍皂苷XLIX(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品GypenosideXLIX釀酒酵母Saccharomycescerevisiae宛氏擬青霉Paecilomycesvariotii
D-(-)-奎寧訂購|咨詢規(guī)格:≥98%;20mg人黑色素瘤優(yōu)先表達抗原(PRAME)ELISA試盒人96T0.156-10ng/mL大鼠β防御素2(DEFB2)ELISA試盒,英文名:DEFB2ELISAKit
甘草訂購|咨詢規(guī)格:20mg白細胞介素-10受體β抗體UGCGELISAKitUDP葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試盒
富馬替芬(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Ketotifenfumarate黑木耳Auriculariaauricula鼠李糖桿菌Lactobacillusrhamnosus
酚酞Phenolphthalein保存:-20℃規(guī)格:100mg轉(zhuǎn)運蛋白家族39成員7抗體
絡塞定訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶13抗體STAT2ELISAKit信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)ELISA試盒
巴佛洛霉素A1質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRBafilomycinA1,fromStreptomycesgriseus桿菌屬Lactobacillussp.三七根腐病菌Cylindrocarponsp.
TACE elisa試劑盒TRF1RAB10化表皮生長因子受體抗體
TrkARab11A化表皮生長因子受體抗體
TRAF1RAB6A化表皮生長因子受體抗體
TRAF2 Rab17化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體
CD8CDC27人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽(PACAP)免疫試盒
CD8 alphaphospho-CRK (Ser41)人垂草扁桃(VMA)免疫試盒
CXCR2K Cadherin人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)免疫試盒
Cystatin BCadherin like 23人程序性細胞死亡因子4(PDCD4)免疫試盒
CKLFCDR2人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)免疫試盒
CK20CRK7人程序性死亡-1(PD-1)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。