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操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。

96孔板血液DNAout（離心法）（5次）規(guī)格：HPLC≥98%;20mgPatchoulialcohol

FTA血片DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）規(guī)格：HPLC≥98%;20mgCantharidin

Southern級動物DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgCyasterone

Southern級血液DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）規(guī)格：HPLC≥98%;20mgPeimine

百萬基級動物DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）規(guī)格：HPLC≥98%;20mgPeiminine

百萬基級血液DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）規(guī)格：HPLC≥98%;20mgPeimisine

磁珠動物DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgBenzoicacid

磁珠血液DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgBenzoylhypacoitine

大提柱式動物DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgbenzoylpaeoniflorin

大提柱式血液DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgBenzoylaconitine

凋亡DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgBenzoylmesaconine

動物DNAout(100mL)規(guī)格：HPLC≥98%;20mgBicuculline

動物DNAout(250mL)規(guī)格：HPLC≥98%;20mgDauricine

糞便DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgDaurisoline

凝固血液DNAout規(guī)格：HPLC≥98%;20mgPristimerin
IL-2ElisaKitNeohesperidin新橙皮苷13241333

Triethylsulfonium bis(trifluoromethylsulfonyl)imide三雙(三酰)亞321746490

Perrhenic acid高錸13768111

1,5Dihydroxy naphthalene1,5二羥83567

Casein Agar酪蛋白瓊脂

DAllylglycineD甘氨54594068

Cupric chloride無水銅7447394

Anion exchange resin,weak basic styrene弱性系陰離子交換樹脂

Sodium hypochlorite次7681529

Potassium trimethylsilanolate三硅鉀10519967

Iodic acid7782685

2,4,6Trimethylaniline2,4,6三32264

Monensin decyl ester金葉樹苷癸164231696

2Indanone2茚615134

BOCDGLU(OTBU)OHBOCD谷氨5叔104719633

和厚樸 35354746 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

扶桑甾  訂購|咨詢  規(guī)格： 10mg

異綠原A 2450535 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

β谷甾 83465 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

丹參Ⅰ 568730 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

華蟾它靈 1108685 訂購|咨詢  規(guī)格： 10mg

長春 1617909 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

蒼術(shù)苷A 126054771 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

白花前胡素 81740070 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

新補骨脂異黃 41060155 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

青藤 115537 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

諾米林 1063770 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial

薄荷腦 89781 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

黃杞苷 572316 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

豆腐苷 80154343 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。