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平底微孔板檢測(cè)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用
以平底微孔板的形式開展分子和細(xì)胞分析已然成為當(dāng)下的熱潮。這不僅能夠大大提高通量，還能夠減少試劑用量和降低實(shí)驗(yàn)成本。如今的微孔板檢測(cè)儀提供多種檢測(cè)模式，包括光吸收、熒光和發(fā)光檢測(cè)等，可應(yīng)用在生命科學(xué)研究的各個(gè)方面。
現(xiàn)在我們就來(lái)介紹一下平底微孔板檢測(cè)的幾大類應(yīng)用。
細(xì)胞研究
對(duì)于生命科學(xué)研究而言，細(xì)胞是*的一部分。在開展細(xì)胞相關(guān)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，人們除了檢測(cè)細(xì)胞增殖外，還廣泛使用各種熒光染料、熒光蛋白以及抗體來(lái)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞狀態(tài)以及蛋白靶點(diǎn)的活性。因此，微孔板檢測(cè)主要應(yīng)用于細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡的檢測(cè)，以及信號(hào)通路的分析。
細(xì)胞活力
健康的細(xì)胞才能保證高品質(zhì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，細(xì)胞活力的評(píng)估是許多實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)。代謝活性通常被認(rèn)為是細(xì)胞活力的指標(biāo)，這可通過(guò)細(xì)胞還原電位來(lái)評(píng)估。此外，評(píng)估細(xì)胞膜完整性也是一種簡(jiǎn)便的方法。在此過(guò)程中，微孔板檢測(cè)提供了整個(gè)細(xì)胞群的信息，而不是跟蹤單個(gè)細(xì)胞的行為。
活細(xì)胞固有的還原能力可作為代謝活性的指標(biāo)。在測(cè)定細(xì)胞群體的還原電位時(shí)，信號(hào)與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。
細(xì)胞膜完整性也是細(xì)胞活力檢測(cè)的通用指標(biāo)。只有在細(xì)胞膜受損時(shí)，DNA結(jié)合染料才能進(jìn)入細(xì)胞，因此DNA染色可作為細(xì)胞死亡的標(biāo)志。
細(xì)胞凋亡
細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)顯著特征是Caspase酶的激活，它參與蛋白底物的裂解和隨后的細(xì)胞解體。微孔板檢測(cè)可以對(duì)活細(xì)胞以及細(xì)胞裂解液或提取物中的活性Caspase進(jìn)行分析?；谖⒖装宓腸aspase分析通常是采用熒光和顯色檢測(cè)。它利用caspase酶的活性和特別設(shè)計(jì)的報(bào)告底物來(lái)產(chǎn)生熒光或顯色的信號(hào)，這可通過(guò)微孔板檢測(cè)儀來(lái)讀取。
細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖分析對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化研究是至關(guān)重要的，在藥物開發(fā)期間常用于評(píng)估化合物毒性和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制。增殖檢測(cè)通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝，或者是定量DNA的合成。通過(guò)微孔板檢測(cè)平臺(tái)，人們可高通量地開展細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性或藥物功效研究。