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            武漢尚恩生物技術(shù)有限公司

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            6步教你動物細(xì)胞如何培養(yǎng)?

            閱讀:2619      發(fā)布時間:2022-9-16
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            細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)各領(lǐng)域的基礎(chǔ)技術(shù)和基本技能,它也是細(xì)胞工程、基因工程和生物醫(yī)學(xué)工程的重要研究手段。那我們在實際的動物細(xì)胞培養(yǎng)實驗中需要注意哪些基本要求呢?


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            實驗前準(zhǔn)備
            實驗前必須分門別類地制訂操作卡片,如清洗卡、消毒卡、細(xì)胞常用液(細(xì)胞培養(yǎng)液、BSS液、消化液)配制卡、牛血清檢測分裝卡、細(xì)胞原代和傳代操作卡等。各卡片上注明實驗所需器材的名稱、規(guī)格、數(shù)量、操作要領(lǐng)和實驗注意事項等。實驗前應(yīng)按卡片收集、清點(diǎn)所需用品,一并放入超凈臺內(nèi),這樣可避免操作時因物品不全而往返拿取所浩成的污染。同時,根據(jù)每個實驗的要求,準(zhǔn)備好瓶管支架器械消毒盒等。實驗器材準(zhǔn)數(shù)要大于實驗使用數(shù),瓶蓋數(shù)要大于瓶數(shù)。這樣才能有條不紊地做實驗,也減少了忙亂操作所引起的污染。
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            無菌室和操作室消毒
            無菌室內(nèi)每周用乳酸蒸氣(或過氧乙酸)加紫外線消毒1~2次。實驗前,將實驗器材放入超凈臺內(nèi),打開超凈臺紫外線燈,同時啟動超凈臺風(fēng)機(jī),40 min后消毒完畢,關(guān)閉紫外線燈。這樣,超凈臺內(nèi)空氣被凈化,超凈臺面構(gòu)成相對無菌的環(huán)境。
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            無菌操作要求

            ①手指不能觸及器材使用端。如觸及,器材需更換或燒灼后再使用(如瓶口)。

            ②減少手與器材的接觸面,學(xué)會手指操作。

            ③一切操作,如打開或封閉瓶口,安裝吸管、注射器等,都要在火焰前方進(jìn)行。瓶口、吸管、注射器使用前要經(jīng)過火焰消毒后使用。

            ④瓶口順風(fēng)斜放在支架上。試劑用后立即封閉瓶口。瓶口長時間敞開會增加落菌的機(jī)會。

            ⑤不同的細(xì)胞同時操作時,要專管專用,并要勤換吸管,防止擴(kuò)大污染和交叉污染。

            ⑥瓶口液滴不能倒回瓶內(nèi)。液滴用干酒精棉球擦拭,瓶口再經(jīng)火焰消毒。

            ⑦操作者動作要準(zhǔn)確敏捷,盡量避免空氣流動。

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            實驗中操作要求

            洗手、著裝與外科臨床要求相同。雙手用肥皂洗凈后浸泡于消毒液中,并用75%的酒精擦拭。細(xì)胞培養(yǎng)用液從冰箱取出,試劑瓶口和外壁經(jīng)灑精外布擦洗后人超凈臺,超凈臺面要用酒精紗布擦拭。超凈臺上的物品面布局合理,污染廢液缸、酒精棉球缸在右側(cè)位,酒精燈在中央位,試劑瓶在左側(cè)位。拆除大包裝,點(diǎn)燃灑精燈(95%灑精)、火焰無色或微黃色表示酒精雜質(zhì)少,酒精燃燒*(不能使用廢酒精或工業(yè)酒精,這類酒精燃燒時產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)易附著到吸管或其他瓶、皿上,帶入培養(yǎng)液中會傷害細(xì)胞)。


            浸泡75%酒精中的金屬器械用臺面消毒鑷子取出,經(jīng)無菌干紗布擦拭后,迅速通過火焰(器械不能在火焰中灼燒過長時間),冷卻后使用,避免燙傷細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)液、牛血清、酶液的吸管,使用后不能再用火焰消毒,因為吸管中殘留的培養(yǎng)液被燒焦碳化,再使用時,會把有害碳化物帶入培養(yǎng)液中毒害細(xì)胞。操作中手指被污染時,可用酒精紗布或棉球擦拭。在實驗過程中,不要面向操作臺講話或咳嗽,避免將唾沫中微生物帶入超凈臺內(nèi),污染空氣。實驗者離開超凈臺時,立即用肘關(guān)節(jié)關(guān)閉側(cè)窗口,避免無菌室內(nèi)細(xì)菌隨空氣流入凈化操作區(qū)。

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            實驗后要求
            實驗完畢,關(guān)閉超凈臺風(fēng)機(jī)和電源,未使用過的器材放入飯盒內(nèi),用過的玻璃器材投入清水中浸泡,包裝紙疊卷,繩成束分類歸人,最后,超凈臺面用酒精紗布或棉球擦拭,紫外線消毒。
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            注意事項

            無菌操作離不開火和酒精,操作中避免事故發(fā)生。要用打火機(jī)點(diǎn)火?;鸩顸c(diǎn)火時,火星熄滅后投入廢缸內(nèi)(缸內(nèi)有廢酒精棉球)。酒精濺出臺面或瓶外壁時,立即擦干;一旦發(fā)生著火事故,立即關(guān)閉超凈臺風(fēng)機(jī),用飯盒、濕布撲滅火焰。



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            公 司 簡 介


            武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城,專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù),公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實驗室、動物房,已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證,獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽(yù)?! ?/span>


            公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購;細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種,同時通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類;公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等?! ?/span>


            公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機(jī)構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司,不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)!尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商!



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