狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

            | 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

            17764018385

            當(dāng)前位置:首頁   >>   技術(shù)文章   >>   干貨?。K-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)傳代標(biāo)準(zhǔn)操作流程

            武漢尚恩生物技術(shù)有限公司

            立即詢價

            您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

            干貨?。K-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)傳代標(biāo)準(zhǔn)操作流程

            閱讀:1142      發(fā)布時間:2023-2-20
            分享:


             細胞基本信息

             

             

            --細 胞 基 本 信 息---

            細胞名稱: SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

            細胞別稱: SK-Lu-1;SK LU 1;SK-Lu1;SK-LU1;SKLU-1;SKLU1;SKLU01

            細胞貨號: SNL-229

            生長特性: 貼壁

            培養(yǎng)條件: DMEM+10% FBS+1% P/S

            培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%

            細胞簡介: SK-LU-1細胞來源于一名64歲患有肺腺癌(III級)的白人女性。SK-LU-1細胞在免疫耐受大鼠中是致瘤的。SK-LU-1細胞支原體污染于1971年被發(fā)現(xiàn)并消除,可以用于3D細胞培養(yǎng)。

             

             

            SK-LU-1細胞正常生長形態(tài)照片

             

             

             

             SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)的特點

             

             


            1、細胞顆粒感較重

            細胞傳代培養(yǎng)時細胞內(nèi)黑點及細胞外顆粒較多,建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞;


            2、傳代、復(fù)蘇注意細胞狀態(tài)

            細胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒,進而影響活細胞狀態(tài),注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔,嚴(yán)格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范,傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細胞,建議換液一次去除死亡細胞;

             

             

            細胞收貨攻略


            常溫細胞

             

            1. T25瓶收貨后,拆開外包裝,用75%酒精消毒T25瓶表面,放37℃培養(yǎng)箱靜置2-4h;

            2. 吸走大部分培養(yǎng)基并留10-12 ml,顯微鏡下拍照保存細胞狀態(tài)照片,觀察細胞密度,若細胞密度大于80%即可按比例傳代(傳代比例建議1:2),若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上再進行傳代培養(yǎng);

             


            凍存細胞

            1. 細胞收貨后盡快開箱檢查,若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱(2-3天內(nèi)復(fù)蘇)短期保存或液氮中長期保存,若干冰揮發(fā)建議立即復(fù)蘇細胞并聯(lián)系銷售人員解決;

            2. 凍存細胞建議盡快復(fù)蘇一管培養(yǎng)檢查,以免超出售后期,復(fù)蘇步驟參考復(fù)蘇攻略;

            3. 復(fù)蘇一管細胞出現(xiàn)異常及時聯(lián)系銷售人員,在專業(yè)技術(shù)支持的指導(dǎo)下進行下一步操作;

             

             

            Tips:

            1. 細胞收貨出現(xiàn)漏液、培養(yǎng)瓶破損、干冰揮發(fā)等異常情況時,及時拍照聯(lián)系銷售人員;

             

            2. 該細胞貼壁生長,一般T25瓶運輸過程中較少出現(xiàn)大量細胞脫落并聚團的情況,少量細胞脫落是正常狀態(tài),不影響細胞生長,按正常操作步驟繼續(xù)培養(yǎng)即可。

             

            3. 尚恩生物T25瓶發(fā)貨的細胞內(nèi)含對應(yīng)細胞的培養(yǎng)基,可以收集原裝培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基經(jīng)1500rpm離心5min后,取上清于4℃保存用于后續(xù)細胞培養(yǎng);

             

             

            細胞傳代攻略

             

             

            1. 先盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,再加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;

            2. T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層,將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;

            3. 消化到細胞間隙變大,但未脫落時加2-3ml培養(yǎng)基終止胰酶消化;

            4. 混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;

            5.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,補足培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

             

             

            Tips:

            1. 對于消化細胞程度,客戶如果經(jīng)驗不多,無法準(zhǔn)確掌控胰酶作用時間,建議客戶按照下述操作:胰酶首先復(fù)溫到室溫后加入細胞,放入37度培養(yǎng)箱,然后每隔30秒,即吹打下細胞(此時吹打細胞應(yīng)盡量輕柔,不能強行將細胞吹下,否則細胞可能出現(xiàn)機械損傷),如果能夠吹打散細胞,說明細胞消化完成可以終止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重復(fù)操作直至能夠輕柔的吹下細胞;

             

            2. T25瓶加10-12ml培養(yǎng)基,10cm皿加12-15ml,2-3天換液一次。

             

            3. 細胞收貨后傳代建議按1:2傳代,后續(xù)培養(yǎng)可以視具體細胞生長狀態(tài)和密度情況決定傳代比例;

             

            4. 傳代后24h建議觀察細胞并換液一次去除死亡細胞;



            文獻引用

             

            圖片1.png 

             

             

            CAT#:            SNL-492

            Product name:   SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

            Date:            2022/12/23

            Journal:         Nature Communications

            Impact Factor:   17.694

            Title:        

            USP5-Beclin 1 axis overrides p53-dependent senescence and drives Kras-induced tumorigenicity

            PMID:           PMID: 36528652

             

             


            產(chǎn)品推薦

            SNL-492】SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

            SNLM-492】SK-LU-1細胞專用培養(yǎng)基

            SNT-0010.25%胰酶(不含EDTA)



            會員登錄

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗證碼

            收藏該商鋪

            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

            常用:

            提示

            您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
            在線留言