脂溶性維生素由長的碳?xì)滏溁虺憝h(huán)組成的聚戊二烯化合物。脂溶性維生素包括維生素A、D、E和K，它們都含有環(huán)結(jié)構(gòu)和長的、脂肪族烴鏈，這四種維生素盡管每一種都至少有一個極性基團(tuán)，但都高度疏水的。某些脂溶性維生素并不是輔酶的前體，而且不用進(jìn)行化學(xué)修飾就可被生物體利用。
脂溶性維生素的樣品前處理過程分為溶解、皂化、萃取、水洗、脫水和濃縮6個步驟。
在進(jìn)行脂溶性維生素樣品試驗(yàn)的時候，可能會遇到哪些問題
問題一試樣處理過程中，試樣不溶解于水，或溶解不均勻。
應(yīng)采取均勻取樣：對于脂肪含量高的樣品，可適當(dāng)減少取樣量，防止樣品因皂化不*而出現(xiàn)氮吹后殘留油狀物質(zhì)的情況。對于含淀粉的樣品，應(yīng)先酶解再進(jìn)行皂化。對于不溶于水或溶解不均勻的樣品，可先振蕩再進(jìn)行超聲溶解。
問題二萃取及水洗過程中，出現(xiàn)乳化現(xiàn)象。
應(yīng)避免大力振搖分液漏斗，以防出現(xiàn)乳化現(xiàn)象而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。若出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，可加入少量飽和食鹽水，并靜置直至分層。
問題三無法氮吹干，或氮吹后底部殘留油狀物質(zhì)。
確保漏斗及雞心瓶干燥。脫水過程中，應(yīng)防止漏斗外壁的水流入雞心瓶中，以免出現(xiàn)氮吹不干的現(xiàn)象。氮吹干后，應(yīng)根據(jù)樣品含量確定定容體積。
問題四實(shí)驗(yàn)過程中未考慮脂溶性維生素遇光、遇氧、遇熱不穩(wěn)定的性質(zhì)，造成脂溶性維生素的損失。
實(shí)驗(yàn)全程應(yīng)避光操作：皂化前需加入抗壞血酸，并充氮?dú)膺M(jìn)行保護(hù)。皂化完成后應(yīng)立即冷卻至室溫，萃取完成后應(yīng)在40±2℃的條件下旋蒸至近干，但決不允許旋蒸干。維生素A、D、E、K1的標(biāo)準(zhǔn)儲備液-10℃以下避光保存且使用前需校正濃度，標(biāo)準(zhǔn)工作液需臨用前配置。
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